[发明专利]检测DNA点突变的方法(SNP分析)和相关的装置有效
申请号: | 200480021969.1 | 申请日: | 2004-05-28 |
公开(公告)号: | CN101094923A | 公开(公告)日: | 2007-12-26 |
发明(设计)人: | 沃尔特·冈布雷赫特;彼得·波里卡;曼弗雷德·斯坦泽尔 | 申请(专利权)人: | 西门子公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12P19/34 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 | 代理人: | 巫肖南;封新琴 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 dna 突变 方法 snp 分析 相关 装置 | ||
1.一种用于检测DNA点突变(SNP分析)的方法,其中利用待测目标DNA与在DNA芯片上位置特异性固定的捕手DNA的结合(杂交),其中进行限定的时间过程,具有以下步骤:
a)以已调整的流速将洗涤溶液导引到DNA芯片上,
b)按规定改变杂交位置上的温度,
c)温度依赖性地熔解捕手/目标DNA杂交体并通过流动的洗涤溶液将捕手/目标DNA杂交体从杂交位置上移开,
d)在预定时间间隔内将流速调整为零,
e)在当前温度下位置特异性地检测已结合的目标DNA,而对结合的目标DNA的位置特异性检测通过“未被洗掉的”洗涤溶液进行,
f)根据预定程序评估信号。
2.根据权利要求1的方法,其特征在于,多次重复步骤a)到e)。
3.根据权利要求1或2的方法,其特征在于,温度变化在于持续不断的升高。
4.根据权利要求3的方法,其特征在于,持续不断的温度升高作为时间的函数是线性的。
5.根据权利要求4的方法,其特征在于,持续不断的温度升高以带有保持时间的斜面作为时间的函数进行。
6.根据权利要求5的方法,其特征在于,在保持时间中在DNA芯片上的液流被停止。
7.根据上述任何一项权利要求的方法,其特征在于,对已结合的目标DNA的检测是以无标记(无标记物)的形式进行的。
8.根据权利要求9的方法,其特征在于,无标记检测以光学形式进行。
9.根据权利要求8的方法,其特征在于,光学检测利用DNA双链熔解期间UV吸收的内在变化。
10.根据权利要求7的方法,其特征在于,无标记检测以电学方式进行。
11.根据权利要求7的方法,其特征在于,无标记检测借助内在的鸟嘌呤氧化进行。
12.根据权利要求10的方法,其特征在于,利用电化学阻抗方法进行无标记检测。
13.根据权利要求7的方法,其特征在于,以重量测量的方式进行无标记检测。
14.根据权利要求1到5的任何一个的方法,其特征在于,在利用标记(标记物)的情况下进行已结合的目标DNA的检测。
15.根据权利要求14的方法,其特征在于,借助光学标记进行检测。
16.根据权利要求14的方法,其特征在于,借助磁性标记进行检测。
17.根据权利要求16的方法,其特征在于,借助酶标记进行检测。
18.根据权利要求17的方法,其特征在于,所述洗涤溶液含有酶底物。
19.根据权利要求18的方法,其特征在于,所述酶在所使用的温度范围是稳定的(有活性的)。
20.根据权利要求16到19的方法,其特征在于,所述酶标记催化的反应是光学可检测的。
21.根据权利要求16到19的方法,其特征在于,所述酶标记催化的反应是电化学可检测的。
22.根据权利要求21的方法,其特征在于,在电化学检测方法中涉及利用氧化还原循环进行加强的电流测量。
23.根据权利要求16到19的方法,其特征在于,检测和评估底物或产物浓度的改变。
24.根据上述任何一项权利要求的方法,其特征在于,传感器信号(检测信号)的评估和显示作为温度的函数进行。
25.根据权利要求24的方法,其特征在于,在确定的温度上进行熔解曲线的标准化。
26.根据上述任何一项权利要求的方法,其特征在于,所述评估是计算机控制的。
27.根据权利要求26的方法,其特征在于,所述评估是根据软件进行的。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于西门子公司,未经西门子公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/200480021969.1/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。