[发明专利]制备核酸样品的方法和试剂盒无效
| 申请号： | 200480025769.3 | 申请日： | 2004-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN101528943A | 公开（公告）日： | 2009-09-09 |
| 发明（设计）人： | 约翰·E·布吕默;曹燕翔 | 申请（专利权）人： | 阿菲梅特里克斯公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 中原信达知识产权代理有限责任公司 | 代理人： | 杨 青;樊卫民 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 制备 核酸 样品 方法 试剂盒 | ||
1.一种制备核酸样品的方法，包括：
将引物混合物与多种RNA转录本或来自RNA转录本的核酸杂交， 并合成互补于RNA转录本的第一链cDNAs和互补于第一链cDNAs的 第二链cDNAs；其中引物混合物包括具有启动子区域和随机序列引物 区域的寡核苷酸；和
从启动子区域起始转录RNA以产生核酸样品。
2.权利要求1的方法，其中随机序列引物区域是随机六聚体。
3.权利要求2的方法，其中启动子区域包括原核启动子。
4.权利要求2的方法，其中启动子区域包括噬菌体启动子。
5.权利要求4的方法，其中启动子区域包括T7启动子。
6.权利要求4的方法，其中启动子区域包括T3启动子。
7.权利要求4的方法，其中启动子区域包括SP6启动子。
8.权利要求1的方法，其中RNA转录本是真核mRNA。
9.一种制备核酸样品的方法，包括：
将引物混合物与多种RNA转录本或来自RNA转录本的核酸杂交， 并合成并合成互补于RNA转录本的第一链cDNAs和互补于第一链 cDNAs的第二链cDNAs以产生第一cDNAs；其中引物混合物包括具有 启动子区域和随机序列引物区域的寡核苷酸；
从启动子区域起始转录RNA以产生cRNAs；
将随机引物混合物与cRNAs杂交；和
从随机引物合成第二cDNAs。
10.权利要求9的方法，其中随机序列引物区域是随机六聚体。
11.权利要求10的方法，其中启动子区域包括原核启动子。
12.权利要求10的方法，其中启动子区域包括噬菌体启动子。
13.权利要求12的方法，其中启动子区域包括T7启动子。
14.权利要求12的方法，其中启动子区域包括T3启动子。
15.权利要求12的方法，其中启动子区域包括SP6启动子。
16.权利要求9的方法，其中RNA转录本是真核mRNA。
17.权利要求9的方法，其中随机引物是随机六聚体。
18.分析多种转录本的方法，包括：
将引物混合物与多种RNA转录本或来自RNA转录本的核酸杂交， 并合成并合成互补于RNA转录本的第一链cDNAs和互补于第一链 cDNAs的第二链cDNAs以产生第一cDNAs；其中引物混合物包括具有 启动子区域和随机序列引物区域的寡核苷酸；
从启动子区域起始转录RNA以产生cRNAs；
将随机引物混合物与cRNAs杂交；
从随机引物合成第二cDNAs；
使第二cDNAs片段化以产生片段化的cDNAs；
将片段化的cDNAs与多个核酸探针杂交以检测代表靶转录本的核 酸。
19.权利要求18的方法，其中随机序列引物区域是随机六聚体。
20.权利要求18的方法，其中启动子区域包括原核启动子。
21.权利要求21的方法，其中启动子区域包括噬菌体启动子。
22.权利要求21的方法，其中启动子区域包括T7启动子。
23.权利要求21的方法，其中启动子区域包括T3启动子。
24.权利要求21的方法，其中启动子区域包括SP6启动子。
25.权利要求18的方法，其中RNA转录本是真核mRNA。
26.权利要求18的方法，其中随机引物是随机六聚体。
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