[实用新型]庆大霉素快速半定量检测试纸

说明书

技术领域

本实用新型涉及动物性食品中一种抗生素残留检测试纸，特别涉及一种庆大霉素检测试纸。

背景技术

抗生素残留是全世界畜禽养殖中普遍存在的问题，其中庆大霉素是一种比较常见的残留抗生素。庆大霉素是一种氨基糖苷类抗生素，其在治疗家畜细菌感染性疾病中发挥了重要作用，但其残留物毒副作用比较大，欧美国家多年前即以法规禁止抗生素残留超限量的牛奶上市，发现有抗生素的奶场必须停产，甚至要收回产品销毁。但据专家判断，“有抗奶”目前仍流通于我国部分城市。为了加强兽药残留管理工作，保证畜产品质量安全，我国农业部于2002年修订了《动物性食品中兽药最高残留限量》，其中规定牛奶中庆大霉素的最高残留限量为200μg/kg，对羊、猪、鸡等其他动物肌肉、脂肪、肾脏中庆大霉素残留也有相应限量规定。

对庆大霉素残留的检测目前主要采用高效液相色谱法(HPLC)。然而，由于氨基糖苷类抗生素缺少发色基团，应用到HPLC时常要对其衍生化，样品前处理繁琐，测定方法相当复杂，需受过专门训练的人员才能操作，检测通量很小。在我国目前动物养殖分散经营的情况下，很难统一管理，因此造成动物源性食品的质量很难一致，单纯采用大型仪器检测监控产品质量，很不现实，而且仪器检测费用高，很难普及使用。国外对庆大霉素残留的检测普遍采用快速筛选检测结合仪器确证的方法，我国在大量样品快速筛选检测技术方面上研究不多。微生物抑制法是一种较为常用的抗生素筛选检测方法，其主要原理是根据抗微生物药对特异微生物的抑制作用来检测受检样品中残留的抗微生物药，主要包括杯碟法、纸片法、琼脂扩散法和氯化三苯基四氮唑法，虽然目前仍在使用，但这些方法特异性差，耗时费力，测定结果误差很大。ELISA法是另一种目前研究较多的抗生素筛选检测方法，具有灵敏度高、检测量大、成本低等优点，但该方法也需酶标仪等部分实验室设备，分析时间一般1-4小时，仍有一定局限性。因此，目前我国相应的庆大霉素检测技术并不很完备，很有必要研制更加简单快捷方便的检测产品。

发明内容

本实用新型的目的即在于研制出简便、灵敏、价格低廉的庆大霉素快速半定量检测试纸。

庆大霉素快速半定量检测试纸含有背衬、样液吸收部分、胶体金标记部分、检测反应部分，样液吸收部分、胶体金标记部分、检测反应部分及吸水部分，依次粘贴在背衬上。

胶体金标记部分为玻璃纤维或醋酸纤维或尼龙膜，其上标记的物质为第二种属动物蛋白和庆大霉素抗体的混合物，或第二种属动物蛋白与庆大霉素检测用抗原的混合物。

检测反应部分上面包被有庆大霉素检测用抗原1-3条作为检测线，或包被有庆大霉素抗体1-3条作为检测线，同时还包被有抗第二种属动物蛋白的IgG1-3条作为参考线。

检测线和参考线组合时不能同时多于1条，组合线条数为2-4条，组合方式为1条检测线+1条参考线、1条检测线+2条参考线、1条检测线+3条参考线、2条检测线+1条参考线、3条检测线+1条参考线五种形式。根据半定量检测的准确度要求，组合线数越多，半定量越准确。

本实用新型中检测用抗原是指庆大霉素与载体物质形成的偶合物，其中载体物质包括蛋白质、蛋白质片段、合成多肽、半合成多肽、多糖，如血清白蛋白、球蛋白、脂蛋白、多聚氨基酸、葡聚糖，示例性的载体物质包括牛血清白蛋白、卵清白蛋白、匙孔血蓝蛋白、甲状腺球蛋白、L-多聚赖氨酸等。另外，载体物质也可以是具有活性基团的其他合成或天然聚合物，如白喉毒素、破伤风毒素、酵母、尼龙、右旋葡聚糖、纤维素等，同样也可以用来制备检测用抗原。第二种属动物蛋白指非抗体来源属动物的蛋白，例如，抗体为鼠源性，则第二种属动物蛋白可以是卵清白蛋白、兔血清白蛋白等鸡、兔或其他非鼠源性动物蛋白。

本实用新型所描述的试纸的各部分处理与功能如下：

背衬：为一面涂有不干胶的不吸水的韧性材料，如PVC板，起固定支持试纸其他组成部分的作用。

样液吸收部分制备：将滤纸或玻璃纤维纸浸入pH7.0-8.4的PBS中2min，取出，80℃烘干或其他方式干燥，即作为样液吸收部分，检测时起吸收样品溶液的作用，便于样品溶液向上移动。

胶体金标记部分的制备：该部分起固定胶体金标记的抗原或抗体的作用。制备步骤包括胶体金溶胶的制备、胶体金标记庆大霉素抗体或庆大霉素抗原、胶体金标记部分处理。