[发明专利]生产发酵产物的方法

权利要求书

1.从磨细的含淀粉材料生产发酵产物的方法，包括：

(a)用具有SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的葡糖淀粉酶，或者与其 具有至少70％同一性的葡糖淀粉酶在低于所述含淀粉材料的起始糊化温度 的温度下糖化磨细的含淀粉材料，

(b)使用发酵生物发酵。

2.权利要求1的方法，其中该方法进行1到250小时的时间，优选25 到190小时，更优选30到180小时，更优选40到170小时，甚至更优选 50到160小时，还更优选60到150小时，甚至还更优选70到140小时， 且最优选从80到130小时。

3.权利要求1或2的方法，其中该方法在3到7之间，优选从3.5到6， 或更优选4-5的pH范围内进行。

4.权利要求1至3任一项的方法，其中干固形物含量(DS)位于20-55 wt.-％，优选25-40wt.-％，更优选30-35wt.-％的范围内。

5.权利要求1-4任一项的方法，其中糖化和发酵期间糖浓度保持在低于 大约3wt.％的水平。

6.权利要求1-5任一项的方法，其中在步骤(a)之前制备包含水和磨细的 含淀粉材料的浆料。

7.权利要求1-6任一项的方法，其中该磨细的含淀粉材料通过将含淀 粉材料磨细成0.1-0.5mm的颗粒大小来制备。

8.权利要求1-7任一项的方法，其中该磨细的含淀粉材料是通过干或 湿磨获得的颗粒淀粉。

9.权利要求1-8中任一项的方法，其中该磨细的含淀粉材料是整体谷 物。

10.权利要求1-9任一项的方法，其中同时进行糖化。

11.权利要求10的方法，其中发酵期间的温度在28℃到36℃之间， 例如在29℃到35℃之间，例如在30℃到34℃之间，例如大约32℃。

12.权利要求1-3任一项的方法，其中该葡糖淀粉酶来源于Athelia rolfsii。

13.权利要求1-13中任一项的方法，其中该葡糖淀粉酶以0.001到 10AGU/g DS，优选从0.01到5AGU/g DS，特别是0.1到0.5AGU/g DS的 量存在。

14.权利要求1-13任一项的方法，其中存在酸性α-淀粉酶。

15.权利要求14的方法，其中该酸性α-淀粉酶是真菌α-淀粉酶， 优选来源于曲霉属的菌株，特别是黑曲霉，米曲霉或泡盛曲霉。

16.权利要求15的方法，其中该酸性α-淀粉酶是与SEQ ID NO：4 具有至少70％，优选至少75％，80％，85％或至少90％，例如至少95％，至 少97％，至少98％，或至少99％同一性的氨基酸序列的酸性α-淀粉酶。

17.权利要求14-16中任一项的方法，其中该真菌酸性α-淀粉酶是包 含α-淀粉酶催化结构域(CD)和糖结合模块(CBM)和任选的接头或野生型真 菌酸性α-淀粉酶催化结构域(CD)和糖结合模块(CBM)和任选的接头的杂合 体酶。

18.权利要求17的方法，其中该CBM来源于Aspergillus kawachii α- 淀粉酶，Athelia rolfsii葡糖淀粉酶，或黑曲霉葡糖淀粉酶。

19.权利要求17或18的方法，其中该CBM来源于Athelia rolfsii葡 糖淀粉酶，黑曲霉葡糖淀粉酶或A.kawachiiα-淀粉酶。

20.权利要求14的方法，其中该酸性α-淀粉酶是酸性细菌α-淀粉 酶。

21.权利要求20的方法，其中该酸性α-淀粉酶来源于地衣型芽孢杆 菌，解淀粉芽孢杆菌和嗜热脂肪芽孢杆菌的菌株。