[发明专利]核酸提取方法及核酸提取装置无效
申请号: | 200580016159.1 | 申请日: | 2005-05-17 |
公开(公告)号: | CN101389757A | 公开(公告)日: | 2009-03-18 |
发明(设计)人: | 森寿弘 | 申请(专利权)人: | 富士胶片株式会社 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12M1/00 |
代理公司: | 北京天昊联合知识产权代理有限公司 | 代理人: | 丁业平;张天舒 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核酸 提取 方法 装置 | ||
1.一种提取核酸的方法,该方法包括:
通过使含核酸的样品溶液与核酸吸附性固体载体接触,从而将核酸吸附到所述的核酸吸附性固体载体上;
在所述核酸吸附在所述的核酸吸附性固体载体上时,通过使洗涤液与所述的核酸吸附性固体载体接触,从而对所述的核酸吸附性固体载体进行洗涤;以及
通过将回收液与所述的核酸吸附性固体载体接触,从而使所述核酸从所述的核酸吸附性固体载体上解吸附;
其中,在所述洗涤液的分注及允许停留的时间以及所述回收液的分注及允许停留的时间这二者中,至少有一个所述时间被控制为预定时间。
2.根据权利要求1所述的方法,
其中将所述洗涤液的允许停留时间控制为50秒到1,000秒。
3.根据权利要求1所述的方法,
其中将所述洗涤液的允许停留时间控制为100秒到300秒。
4.根据权利要求1到3中的任意一项所述的方法,
其中将所述回收液的允许停留时间控制为20秒到300秒。
5.根据权利要求1到3中的任意一项所述的方法,
其中将所述回收液的允许停留时间控制为25秒到60秒。
6.根据权利要求1到5中的任意一项所述的方法,
其中所述的核酸吸附性固体载体是通过基本不涉及离子键的相互作用来吸附核酸的核酸吸附性固体载体。
7.根据权利要求1到6中的任意一项所述的方法,
其中用于制备含核酸的样品溶液的方法包括:
将含有选自离液盐、表面活性剂、消泡剂、蛋白酶和核酸稳定剂中的化合物的预处理溶液与试验样品混合,从而得到混合后的溶液;以及
向所述的混合溶液中加入水溶性有机溶剂。
8.根据权利要求7所述的方法,
其中所述的核酸稳定剂为巯基化合物。
9.根据权利要求7或8所述的方法,
其中所述的离液盐为胍盐。
10.根据权利要求7到9中的任意一项所述的方法,
其中所述的水溶性有机溶剂包括甲醇、乙醇、丙醇和丁醇中的至少一种。
11.根据权利要求1到10中的任意一项所述的方法,
其中所述的核酸吸附性固体载体被容纳于核酸提取柱的、具有至少两个开口的容器的内部;以及
其中所述方法包括:
在将所述的含核酸的样品溶液分注到所述的核酸提取柱中之后,通过压力差使所述的样品溶液中的所述核酸吸附到所述的核酸吸附性固体载体上;
在将所述的洗涤液分注到所述的核酸提取柱中之后,通过压力差除去杂质;以及
在将所述的回收液分注到所述的核酸提取柱中之后,通过压力差使吸附到所述的核酸吸附性固体载体上的所述核酸从该核酸吸附性固体载体上分离出来,从而与所述回收液一起回收所述核酸。
12.一种用于实施根据权利要求11的所述方法的核酸提取装置,
其中所述的核酸吸附性固体载体为过滤材料。
13.根据权利要求12所述的核酸提取装置,
其中所述的核酸提取装置通过加压自动地实施提取操作;以及
其中所述的提取操作包括:
在将含核酸的样品溶液分注到核酸提取柱中之后,使所述的样品溶液中的所述核酸吸附到所述的过滤材料上;
在将洗涤液分注到所述的核酸提取柱中之后,除去杂质;以及
在将回收液分注到所述的核酸提取柱中之后,使吸附到所述的过滤材料上的所述核酸从该过滤材料上分离出来,从而与所述回收液一起回收所述核酸。
14.根据权利要求12或13所述的核酸提取装置,该装置包括:
压缩空气供给机构,其通过加压嘴将压缩空气引入到所述的核酸提取柱中;以及
分注机构,该机构包括:第一分注嘴,用于将洗涤液分注到所述的核酸提取柱中;以及第二分注嘴,用于将回收液分注到所述的核酸提取柱中。
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