[发明专利]基于生物条形码检测靶分析物

权利要求书

1.检测样品中存在的一种或多种靶分析物的方法，样品中的各靶分析物具有与特异性结合补体发生特异性结合相互作用的至少两个结合位点，该方法包括步骤：

a)提供至少一种类型的捕捉基质，该捕捉基质具有与其结合的与特异性靶分析物的至少第一结合位点结合的该特异性靶分析物的至少一个特异性结合补体；

b)提供至少一种类型的微粒检测探针，该微粒检测探针包含具有下列成份与其结合的微粒：(i)特异性靶分析物的至少一个特异性结合补体和(ii)多个DNA条形码，该DNA条形码任选用报道标记进行标记，其中与微粒检测探针结合的特异性结合补体与该靶分析物的至少一个第二结合位点结合；

c)将捕捉基质与相信含有靶分析物的样品在允许特异性靶分析物与结合到捕捉基质上的特异性结合补体结合的有效条件下接触以便将该靶分析物固定到捕捉基质上；

d)将固定的靶分析物与至少一种类型的微粒检测探针在允许靶分析物与结合到微粒检测探针上的该分析物的特异性结合补体之间结合并在存在靶分析物时在捕捉基质上形成复合物的有效条件下进行接触；

e)任选分离和洗涤捕捉基质以去掉未结合的微粒检测探针；和

f)检测DNA条形码的存在，其中存在该DNA条形码表示样品中存在特异性靶分析物。

2.权利要求1的方法，其中该靶分析物是蛋白质或半抗原且其特异性结合补体是包含单克隆抗体或多克隆抗体的抗体。

3.权利要求1的方法，其中该靶分析物是核酸分子。

4.权利要求1的方法，其中各DNA条形码用可检测的报道基团标记。

5.权利要求1的方法，其中可检测的报道基团包括荧光团，发色团，氧化还原活性基团，具有电标记的基团，放射性基团，催化基团，或拉曼(Raman)标记。

6.权利要求1的方法，其中该微粒用多个DNA条形码标记。

7.权利要求1的方法，还包括在靶分析物固定在其上之后和在捕捉基质与微粒检测探针接触之前洗涤捕捉基质的步骤。

8.权利要求1的方法，其中在所述的检测步骤之前和所述的分离和洗涤步骤之后，还包含步骤：

a)在从微粒检测探针释放DNA条形码的有效条件下处理该复合物；和

b)任选在所述的检测之前扩增该DNA条形码。

9.权利要求8的方法，其中在所述的检测之前将释放的DNA条形码固定在基质上。

10.权利要求1的方法，其中该DNA条形码可直接结合到微粒上。

11.权利要求10的方法，其中该DNA条形码可通过化学释放剂从微粒检测探针上释放出来。

12.权利要求1的方法，其中该微粒还包含与其结合的寡核苷酸且该DNA条形码与结合到微粒上的寡核苷酸的至少一部分杂交。

13.权利要求12的方法，其中该DNA条形码通过去杂交释放出来。

14.权利要求1的方法，其中该捕捉基质是磁性基质。

15.权利要求14的方法，其中所述的分离包括用磁场处理该磁性基质。

16.权利要求15的方法，其中在所述的分离和洗涤步骤之后和所述的检测步骤之前，还包含在释放DNA条形码的有效条件下处理该复合物。

17.权利要求1的方法，其中所述的分离包括过滤，沉淀，浮集，或流体力学。

18.权利要求17的方法，其中该过滤步骤包括去掉不包含DNA条形码的样品成份的膜。

19.权利要求1的方法，其中该微粒是聚合物，玻璃，金属，半导体，或陶瓷。

20.权利要求19的方法，其中该聚合物包含聚苯乙烯。

21.权利要求1的方法，其中该特异性结合对是抗体和抗原。

22.权利要求1的方法，其中该特异性结合对是受体和配体。

23.权利要求1的方法，其中该特异性结合对是酶和竞争性抑制剂。

24.权利要求1的方法，其中该特异性结合对是药物和靶分子。