[发明专利]使用干细胞的体外技术

权利要求书

1.一种使用所提取的血液的方法，包括：

将血液施加到适于选择密度小于1.077g/ml的第一批细胞的第一梯度；

将第一批细胞施加到适于选择密度在1.055到1.074g/ml之间的第二批细胞的第二梯度；

通过培养第二批细胞3到30天来增加密度在1.055到1.074g/ml之间的细胞的数量；和

鉴别所培养的细胞中的内皮祖细胞。

2.根据权利要求1的方法，其中将血液施加到第一梯度包括将血液施加到包括蔗糖和环氧氯丙烷的共聚物的溶液中。

3.根据权利要求1的方法，其中将第一批细胞施加到第二梯度包括将第一批细胞施加到碘克沙醇的水溶液中。

4.根据权利要求1的方法，其中将第一批细胞施加到第二梯度包括将第一批细胞施加到包括用聚乙烯吡咯烷酮包被的硅胶的梯度密度溶液中。

5.根据权利要求1的方法，其中将血细胞施加到第一梯度包括将血细胞施加到Ficoll样梯度中。

6.根据权利要求1的方法，其中将第一批细胞施加到第二梯度包括将第一批细胞施加到OptiPrep样梯度中。

7.根据权利要求1的方法，其中将第一批细胞施加到第二梯度包括将第一批细胞施加到Percoll样梯度中。

8.一种使用所提取的干细胞的方法，包括：

将包括干细胞的组织施加到适于选择密度小于1.077g/ml的第一批细胞的第一梯度；

将第一批细胞施加到适于选择密度在1.055到1.074g/ml之间的第二批细胞的第二梯度；

将第二批细胞施加到适于选择密度在1.055到1.068g/ml之间的第三批细胞的第三梯度；和

通过培养第三批细胞3到30天来增加密度在1.055到1.068g/ml之间的细胞的数量；以及

鉴别所培养的细胞中的内皮祖细胞。

9.根据权利要求8的方法，其中第三梯度适于选择密度在1.059到1.068g/ml之间的细胞，并且其中将第二批细胞施加到第三梯度包含选择密度在1.059到1.068g/ml之间的细胞。

10.一种使用所提取的血液的方法，包含：

将血液施加到适于选择密度小于1.077g/ml的第一批细胞的第一梯度；

将第一批细胞施加到适于选择密度在1.055到1.074g/ml之间的第二批细胞的第二梯度；

在包含血浆的表面上培养第二批细胞；以及

鉴别所培养的细胞中的祖细胞。

11.根据权利要求10的方法，其中培养包括当所述表面用自体血浆包被时，在该表面上培养第二批细胞。

12.根据权利要求10的方法，其中培养包括当所述表面用选自同种异型血浆和异种血浆中的至少一种血浆包被时，在该表面上培养第二批细胞。

13.一种使用组织的方法，包含：

在包含血浆的表面上培养组织。

14.根据权利要求13的方法，其中所述组织包含血液。

15.根据权利要求13的方法，其中所述血浆包含自体血浆。

16.一种使用所提取的血液的方法，包含：

将血液施加到适于选择密度小于1.077g/ml的第一批细胞的第一梯度；

将第一批细胞施加到适于选择密度在1.055到1.074g/ml之间的第二批细胞的第二梯度；

在包含抗体的表面上培养第二批细胞；和

鉴别所培养的细胞中的祖细胞。

17.根据权利要求16的方法，其中祖细胞包括内皮祖细胞(EPC)，并且其中鉴别所述祖细胞包含鉴别EPC。

18.根据权利要求16的方法，其中培养包括当所述表面用自体血浆包被时，在该表面上培养第二批细胞。

19.根据权利要求16的方法，其中培养包括当所述表面用选自同种异型血浆和异种血浆中的至少一种血浆包被时，在该表面上培养第二批细胞。