[发明专利]病原体的非毒株依赖性扩增和针对其的疫苗

权利要求书

1.分离的成熟树突细胞，其包含编码CD40L和一种或多种多肽的 不同等位基因的体外转录的mRNA，所述多肽来自个体受试者中存在 的HIV的多种毒株，其中所述mRNA较完整HIV基因组表现得要少。

2.权利要求1的成熟树突细胞，其中所述mRNA得自对HIV多 核苷酸的核酸扩增。

3.权利要求2的成熟树突细胞，其中使用设计用来弥补HIV的 多种毒株之间的序列变异性的引物，来扩增所述HIV多核苷酸。

4.权利要求1的成熟树突细胞，其中所述多肽包含由：gag多肽、 rev多肽、vpr多肽、env多肽、nef多肽、vpu多肽、vif多肽、pol多 肽组成的组中的两种或多种。

5.权利要求1的成熟树突细胞，其中所述成熟树突细胞来自或者 得自所述受试者。

6.分离的成熟树突细胞，其包含个体受试者中存在的HIV的多种 毒株的HIV多肽，其中所述多肽表现的比全部HIV多肽少。

7.权利要求6的成熟树突细胞，其中所述成熟树突细胞来自或得 自所述受试者。

8.权利要求6的成熟树突细胞，其中所述HIV多肽包含由：gag 多肽、rev多肽、vpr多肽、env多肽、nef多肽、vpu多肽、vif多肽、 pol多肽组成的组的两种或多种。

9.包含权利要求1的成熟树突细胞和可药用载体的疫苗。

10.包含权利要求6的成熟树突细胞和可药用载体的疫苗。

11.权利要求9的疫苗在制备用于治疗HIV感染的患者的药物中 的用途。

12.权利要求10的疫苗在制备用于治疗HIV感染的患者的药物中 的用途。

13.制备自体疫苗的方法，其包括：将来自或者得自HIV感染的 个体的树突细胞用编码CD40L和来自所述个体中存在的HIV的多种 毒株的一种多种HIV多肽的mRNA转染，其中所述mRNA表现的比 完整HIV基因组少。

14.权利要求13的方法，其中通过使用多种引物对进行HIV多核 苷酸的核酸扩增，得到所述核酸，所述引物对是设计用于弥补HIV的 多种毒株之间的变异性的引物对。

15.权利要求14的方法，其中通过如下步骤选择所述引物：

a.选择用于正向引物退火的第一个区和用于反向引物退火的第二 个区，其中所述第一个和第二个区在HIV的可读框和/或表位的侧翼； 和

b.选择所述第一个和第二个区的候选正向和反向引物，其中所述 引物的至少一个设计成弥补HIV的多种变体之间的序列变异性。

16.核酸疫苗，其包含编码下述一种或多种多肽的不同等位基因的 核酸，所述多肽来自受试者中存在的HIV的多种毒株，其中所述核酸 表现的比完整HIV基因组少。

17.权利要求16的核酸疫苗，其中所述核酸是RNA。

18.权利要求16的核酸疫苗，其中所述核酸是DNA。

19.权利要求16的核酸疫苗，其还包含编码CD40L的核酸。

20.权利要求16的核酸疫苗，其中使用多种引物对进行HIV多核 苷酸的核酸扩增得到所述核酸，所述引物对是设计用来弥补HIV的多 种毒株之间的变异性的引物对。

21.权利要求16的核酸疫苗，其中所述多肽包含由：gag多肽、 rev多肽、vpr多肽、env多肽、nef多肽、vpu多肽、vif多肽、pol多 肽组成的HIV多肽组的两种或多种。