[发明专利]白介素－15拮抗剂肽

说明书

发明领域

本发明涉及分子药物学分支，具体涉及来自白介素-15(IL-15)的肽，其消弱IL-15与受体α亚基的结合，因此可用于治疗与IL-15或IL-15Rα的异常表达相关的疾病。 

现有技术

称为IL-15的细胞因子是同时被两个组鉴定为T-细胞活化因子的14-15kDa糖蛋白(Grabstein，K.H.等人，Science 1994，264，965；Burton，J.D.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1994，91，4935)。IL-15 mRNA在不同细胞和组织中广泛表达，然而，由于在翻译水平和细胞内运输上对其表达的强的转录后控制，很难在这些细胞或细胞上清液中发现所述蛋白质(Bamford RN.等人，J.Immunol.1998，160：4418-4426；Kurys G.等人，J.Biol.Chem.2000，275：30653-30659)。此外，已经显示IL-15可以以活性形式作为膜蛋白存在(Musso等人，Blood 1999，第93卷，No 10(5月15日)：第3531-3539页)，最近已经注意到它可以作为配体或受体发挥功能(Budalgian等人，JBC 2004，第279卷，No 40：第42192-42201页)，并通过此途径诱导促炎细胞因子的分泌。 

已经将该可溶性蛋白质的高表达水平与自身免疫疾病和炎性疾病的发病相关联。已经在几种疾病中检测到了IL-15，包括克罗恩病(Kirman I.，1996，Am.J.Gastroenterol.91，1789)、牛皮癣(Rückert R.2000，165：2240-2250)、白血病(Yamada Y.1999，Leukemia and Lymphoma，35(1-2)：37-45)和类风湿性关节炎(RA) (McInnes I.B.1998，Immunology Today，19，75-79)。IL-15与T-细胞受体的结合诱导各种活化抗原和粘附分子的表达，例如CD69、CD25、以及TNFRII、ICAM-1和LAF-1。IL-15还是人血T淋巴细胞的化学引诱物(Wilkinson 1995，J.Exp.Med.181，1255-1259)。所有这些数据都提示，由抗原呈递细胞表达的IL-15可能对于炎症位点处的早期T-细胞活化是很重要的。McInnes等人发现，在该疾病中IL-15的表达异常、滑液中的高IL-15浓度及其在滑膜细胞中的表达。他们认为，IL-15在细胞因子级联中位于TNFα之前，这提出了一种依赖细胞接触的机制，其中经IL-15活化的T-细胞通过巨噬细胞而诱导TNFα合成。此外，还提出IL-15在T-细胞向滑液的迁移中作为重要因子而发挥作用(McInnes，1997，Nat Med，3：189-195)。 

Ziolkowska等人报道了，IL-15在RA患者的关节处诱导IL-17表达，已知该细胞因子刺激滑膜细胞释放几种炎症介质如IL-6、IL-8、GM-CSF和前列腺素E2，这提示了IL-15在RA发病机理中的重要作用(Ziolkowska等人，2000，J Immunol，164：2832-2838)。 

T-细胞的募集和活化可以作为IL-15局部合成的结果而发生，从而，这种非特异性活化可以带来长期炎症。所有这些都提示，IL-15的抑制可能在该疾病的治疗以及其他自身免疫疾病和炎性疾病方面具有治疗潜力。 

IL-15通过与细胞膜受体的结合而介导其生物学效应，所述受体由三个亚基α、β和γ组成。IL-15Rα是对该细胞因子具有特异性的亚基，其以极高的亲和力Kd 10^-11与该细胞因子结合，所述IL-15Rα可以以膜受体或可溶形式存在(Budagian V.等人，JBC 2004，279，39：40368-40375；Mortier等人，The Journal of Immunology，2004，173：1681-1688)。亚基β和γ与IL-2共享，IL-2是与IL-15具有高度结构同源性的细胞因子。先前已经描述，IL-15分子中的Asp56在与受体β亚基的结合中具有重要性，Gln156在与受体γ的结合中具有重要性。 

突变蛋白的行为类似于与受体α亚基结合的IL-15拮抗剂分子， 并消弱通过β和γ亚基的信号转导。识别这些氨基酸的抗体也作为IL-15拮抗剂(US6177079、US6168783、US6013480、US6001973、US9706931、WO9741232)。