[发明专利]装载热激黑素瘤细胞体的树突细胞

说明书

                发明的技术领域

本发明涉及用于诱导对癌的免疫性的组合物和方法，且更具体 地，涉及制备免疫原性癌特异性抗原的制剂、处理和方法。

                    发明背景

不限制本发明的范围，描述了本发明与接种有关的背景。

针对特定靶的适应性免疫应答的活化仍然是免疫学中最复杂的 和广受欢迎的目标之一。免疫活化过程中的关键细胞是树突细胞，这 是因为它能够有效加工和在主要组织相容性复合体(MHC)I和II 类分子上呈递抗原。许多遗传和环境因素影响免疫应答识别和应答抗 原呈递细胞(APC)如树突细胞呈递的经加工的抗原的能力。

对于细胞毒性免疫应答，经典的I类途径模型是使用流感病毒诱 导CD8+细胞毒性T淋巴细胞(CTL)，其需要将具有正确的抗原表 位的肽准确的加工、转运和递送到细胞表面。在由足够的T细胞受体 (TcRs)识别和正确的共刺激后，抗原特异性免疫应答是可能的。尽管 树突细胞有效活化I类限制的CLT，但是进入MHC I类途径以诱导 CD8+T细胞通常需要合成抗原。许多模型包括使用抗原和抗原递送 系统，其将抗原有效递送到MHC I类限制的抗原呈递途径以产生抗 原特异性CD8+T细胞应答。

抗原呈递的其他方法包括将外源抗原递送到树突细胞的MHC I 加工途径，例如，通过将抗原偶联到有效的佐剂、内吞抗原的渗透性 裂解和在pH敏感的脂质体中插入抗原来实现。尽管可用于体外分 析，但这些方法在治疗应用中有困难。迄今为止，可以用外源抗原直 接脉冲树突细胞，所述抗原可使用活的或者经照射形式的完整细胞、 膜制剂、细胞凋亡细胞或者细胞体和从天然来源纯化或者作为重组产 物表达的抗原，见例如，WO 94/02156和美国专利号6,602,709。然 而，这些现有方法不识别死亡细胞形式或者来自树突细胞系统中死亡 的或者垂死的细胞入口的加工途径抗原。

树突细胞用途的一个实例在授予Robbins等人的美国专利号 6,936,468中教导，所述专利为致耐受性的树突细胞在增强宿主中的 致耐受性中的用途和其制备方法。简言之，公开了致耐受性哺乳动物 树突细胞(DC)和制备致耐受性DC的方法。通过对宿主施用致耐 受性哺乳动物DC提供了增强宿主中致耐受性的方法。致耐受性DC 包括具有一个或多个NF-κB结合位点的寡脱氧核糖核苷酸(ODN)。 致耐受性DC可以包括病毒载体，例如，腺病毒载体，其当存在于其 中时不影响致耐受性DC的致耐受性。据说宿主中增强的致耐受性可 用于延长外来移植物存活和治疗炎性相关疾病，如自身免疫病。

树突细胞的另一用途在授予Hwu等人的美国专利号6,734,014中 教导，所述专利为用于转化树突细胞和活化T细胞的方法和组合物。 简言之，通过转化干细胞并使干细胞分化成树突细胞来制备重组树突 细胞。据说所得树突细胞是抗原呈递细胞，其活化针对MHC I类抗 原靶的T细胞。该公开内容还包括基于通过重组树突细胞活化T细 胞的试剂盒、测定和治疗剂。据说癌症、病毒感染和寄生物感染可以 通过所述重组树突细胞或者对应的活化的T细胞改善。

用于树突细胞装载的抗原在例如授予Albert等人的美国专利号 6,602,709中教导。该专利教导了使用细胞凋亡细胞递送抗原到树突 细胞以用于T细胞的诱导或者耐受的方法。据称所述方法和组合物可 用于将抗原递送到用于诱导抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞和T辅 助细胞的树突细胞。该公开内容包括用于评估细胞毒性T淋巴细胞的 活性的测定。靶定树突细胞的抗原是细胞凋亡细胞，其也可以经修饰 以表达非天然抗原以呈递到树突细胞。据称所述树突细胞通过能够加 工和呈递所加工的抗原并诱导细胞毒性T淋巴细胞活性的细胞凋亡 细胞(及其碎片)致敏(prime)，或者也可以用于疫苗疗法中。

最后，授予Steinman等人的美国专利号6,455,299教导了使用病 毒载体递送抗原到树突细胞的方法。据称方法和组合物可用于将抗原 递送到树突细胞，其然后用于诱导T抗原特异性细胞毒性T淋巴细 胞。该公开内容提供了评估细胞毒性T淋巴细胞的活性的测定。使用 病毒载体如流感病毒可以将抗原提供给树突细胞，所述载体可以经修 饰以表达用于呈递到树突细胞的非天然抗原。将树突细胞用载体感染 并且据称所述树突细胞能够呈递该抗原和诱导细胞毒性T淋巴细胞 活性，或者还可以用作疫苗。