[发明专利]分离的谱系阴性造血干细胞及用其治疗的方法

说明书

相关申请的交叉引用

本申请为2004年4月28日提交的美国专利申请序号10/833,743 的部分继续申请，美国专利申请序号10/833,743是2003年7月25 日提交的美国专利申请序号10/628,783的部分继续申请，美国专利 申请序号10/628,783要求2002年7月25日提交的临时专利申请序 号60/398,522以及2003年5月2日提交的临时专利申请序号 60/467,051的权益，上述申请的全部公开内容均通过引用结合到本文 中。

政府利益声明

本文所述工作的一部分由美国国家癌症研究所资助号CA92577 及美国国立卫生研究院资助号EY11254、EY12598与EY125998资 助。美国政府在本发明中具有某些权利。

发明领域

本发明涉及分离的哺乳动物干细胞。更具体地说，本发明涉及 骨髓源的谱系阴性造血干细胞(Lin^-HSC)群，以及通过用分离的Lin^-HSC群治疗哺乳动物眼睛来保持患有眼退化性疾病的哺乳动物视网 膜中的视锥细胞的方法。

发明背景

年龄相关性黄斑变性(ARMD)与糖尿病性视网膜病变(DR)在工业 化国家中是视力丧失的主因，由异常的视网膜血管新生所致。因为 视网膜由界限清楚的神经元层、神经胶质层和血管元件层组成，所 以诸如在血管增生或水肿中可见的相对小的紊乱即可导致视觉功能 显著丧失。遗传性视网膜变性，例如色素性视网膜炎(RP)，也与诸如 微动脉狭窄及血管性萎缩之类的血管异常相关。大部分遗传性人视 网膜变性明确地侵袭视杆光感受器，但也存在伴随的视锥丧失，视 锥是黄斑的主要细胞元件，黄斑是人视网膜中负责集中、精细的视 敏度的区域。视锥特异性存活因子近来已有描述(Mohand-Said等，1998， Proc.Natl.Acad.Sci.USA，95：8357-8362)，可利于视网膜变性小鼠模 型中的视锥存活。

遗传性视网膜变性影响多1/3500的个体，其特征是进行性夜 盲、视野缺损、视神经萎缩、小动脉变细、血管透性改变及通常会 发展为全盲的视野中心缺损(Heckenlively，J.R.编，1988；Retinitis Pigmentosa，Philadelphia：JB Lippincott Co.)。这些疾病的分子遗传学 分析已在110多种不同基因中识别出突变，这些突变解释了仅相对 较小百分率的受侵袭个体(Humphries等，1992，Science 256：804-808； Farrar等，2002，EMBO J.21：857-864)。这些突变中有很多都与包括 视紫红质、cGMP磷酸二酯酶、rds外周蛋白及RPE65在内的光转导 器中的酶和结构组分相关。尽管有这些观察结果，但仍没有减缓或 逆转这些视网膜变性疾病进展的有效疗法。在将野生型转基因传递 到有特定突变的动物的光感受器或视网膜色素上皮(RPE)时，基因疗 法的新进展已实现了小鼠中rds(Ali等，2000，Nat.Genet.25：306-310) 及rd(Takahashi等，1999，J.Virol.73：7812-7816)表型与狗中RPE65表 型(Acland等，2001，Nat.Genet.28：92-95)的成功逆转。