[发明专利]合成核酸分子及制备方法

权利要求书

1.一种分离的核酸分子，其包含具有选择性多肽编码区的合成核苷酸序列，其中所述合成核苷酸序列与编码相应选择性多肽的亲代核酸序列具有90％以下的核酸序列同一性，其中所述降低的序列同一性是所述合成核苷酸序列密码子与亲代核酸序列密码子不同的结果，其中所述核苷酸序列编码选择性多肽，所述多肽与亲代核酸序列编码的相应选择性多肽具有至少85％的氨基酸序列同一性，其中相对于调节序列的平均数，所述合成核苷酸序列的调节序列数目减少，这是所述合成核苷酸序列和所述亲代核酸序列之间序列上不同的密码子随机选择的结果，其中所述合成核苷酸序列在细胞中表达时，赋予氨苄青霉素、嘌呤霉素、潮霉素或新霉素抗性。

2.权利要求1的分离的核酸分子，其中所述调节序列包括转录因子结合序列、内含子剪接位点、聚腺苷酸化位点、启动子组件和/或启动子序列。

3.权利要求1的分离的核酸分子，其中大多数不同的密码子是所需宿主细胞的优选密码子，和/或不是该宿主细胞的低使用密码子。

4.权利要求3的分离的核酸分子，其中在所述合成核酸序列中大多数不同的密码子是哺乳动物中更频繁使用的密码子。

5.权利要求3的分离的核酸分子，其中在所述合成核酸序列中大多数不同的密码子是人体中的优选密码子。

6.权利要求3的分离的核酸分子，其中所述大多数不同的密码子是密码子CGC、CTG、AGC、ACC、CCC、GCC、GGC、GTG、ATC、AAG、AAC、CAG、CAC、GAG、GAC、TAC、TGC和TTC。

7.权利要求1的分离的核酸分子，其中所述核酸分子编码所述选择性多肽与萤光素酶的融合物。

8.权利要求7的分离的核酸分子，其中所述萤光素酶是肾海鳃萤光素酶、萤火虫萤光素酶或叩头虫萤光素酶。

9.权利要求1的分离的核酸分子，其中所述亲代核酸序列是野生型neo、hyg、bla或puro序列。

10.权利要求1的分离的核酸分子，其中所述亲代核酸序列是SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：15或SEQ ID NO：41。

11.权利要求1的分离的核酸分子，其中所述合成核苷酸序列包含以下序列中的可读框：SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：38、SEQID NO：39、SEQ ID NO：42、SEQ ID NO：44；SEQ ID NO：70、SEQ IDNO：71、SEQ ID NO：72、SEQ ID NO：73、SEQ ID NO：74、SEQ IDNO：80、SEQ ID NO：81、SEQ ID NO：82、SEQ ID NO：83或SEQ IDNO：84。

12.权利要求1的分离的核酸分子，其中所述合成核苷酸序列减少了至少10％的调节序列。

13.权利要求1的分离的核酸分子，其中所述合成核苷酸序列具有数目增加的AGC丝氨酸编码密码子、数目增加的ATC异亮氨酸编码密码子、数目增加的CCC脯氨酸编码密码子和/或数目增加的ACC苏氨酸编码密码子。

14.权利要求1的分离的核酸分子，其中在所述合成核苷酸序列中不同的密码子与所述亲代核酸序列相应密码子编码相同的氨基酸。

15.权利要求1的分离的核酸分子，其与以下任一序列中的可读框具有至少90％核苷酸序列同一性：SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：30、SEQID NO：38、SEQ ID NO：39、SEQ ID NO：42、SEQ ID NO：44、SEQ IDNO：70、SEQ ID NO：71、SEQ ID NO：72、SEQ ID NO：73、SEQ IDNO：74、SEQ ID NO：80、SEQ ID NO：81、SEQ ID NO：82、SEQ ID NO：83或SEQ ID NO：84或它们的互补序列。