[发明专利]APOB的RNAi调节及其用途

权利要求书

1.一种iRNA试剂，其包括有义链和反义链，其中所述的有义链具有试剂序号1～74的iRNA试剂的有义链序列中的至少15个连续核苷酸，所述的反义链具有试剂序号1～74的iRNA试剂的反义链序列中的至少15个连续核苷酸。

2.一种iRNA试剂，其包括有义链和反义链，其中所述的有义链具有试剂序号1～19、24～26、29、30和32～42的iRNA试剂的有义链序列中的至少15个连续核苷酸，其中所述的反义链具有试剂序号1～19、24～26、29、30和32～42的iRNA试剂的反义链序列中的至少15个连续核苷酸，其中所述iRNA试剂使与这些试剂孵育后培养的人HepG2细胞中存在的ApoB mRNA的量与没有与该试剂孵育的细胞相比降低了60％以上，和/或使分泌到细胞培养上清中的Apo蛋白的量降低了60％以上。

3.一种iRNA试剂，其包括有义链和反义链，其中所述的有义链具有试剂序号1～12、15、17、24、29、30和32～35的iRNA试剂的有义链序列中的至少15个连续核苷酸，其中所述的反义链具有试剂序号1～12、15、17、24、29、30和32～35的iRNA试剂的反义链序列中的至少15个连续核苷酸，其中所述iRNA试剂使与这些试剂孵育后培养的人HepG2细胞中存在的ApoB mRNA的量与没有与该试剂孵育的细胞相比降低了70％以上，和/或使分泌到细胞培养上清中的Apo蛋白的量降低了70％以上。

4.一种iRNA试剂，其包括有义链和反义链，其中所述的有义链具有试剂序号1～5、7和11的iRNA试剂的有义链序列中的至少15个连续核苷酸，其中所述的反义链具有试剂序号1～5、7和11的iRNA试剂的反义链序列中的至少15个连续核苷酸，其中iRNA试剂使与这些试剂孵育后培养的人HepG2细胞中存在的ApoB mRNA的量与没有与该试剂孵育的细胞相比降低了80％以上，和/或使分泌到细胞培养上清中的Apo蛋白的量降低了80％以上。

5.一种iRNA试剂，其包括有义链和反义链，其中每条链都包括至少有16、17或18个核苷酸的序列，该序列与试剂序号1～74的iRN试剂的序列之一基本上完全相同，除了每条链上分别有不超过1、2或3个核苷酸被其它核苷酸替代(例如腺苷被尿嘧啶替代)外，同时基本保持了抑制培养的人HepG2细胞中ApoB表达的能力，或者保持了在将该iRNA试剂以50mg/kg体重或者100mg/kg体重为动物给药后，将C57B1/6小鼠的鼠肝脏细胞中所存在的apo-B mRNA的量在体内降低至少20％的能力。

6.一种iRNA试剂，其选自试剂序号54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73或74的iRNA试剂组。

7.根据权利要求1所述的iRNA试剂，其中，所述iRNA试剂使与这些试剂孵育后培养的人HepG2细胞中存在的ApoB mRNA的量与没有与该试剂孵育的细胞相比降低了50％以上，和/或使分泌到人HepG2细胞培养上清中的Apo蛋白的量降低了50％以上，和/或使该iRNA试剂以50mg/kg体重或者100mg/kg体重给药后，将C57B 1/6小鼠的鼠肝脏细胞中所存在的apo-B mRNA的量在体内降低至少20％。

8.根据权利要求1～7中任一项所述的iRNA试剂，其中所述的反义RNA链长度为30个或者更少的核苷酸，所述iRNA试剂的双链体区长度为15～30个核苷酸对。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的iRNA试剂，其中所述的iRNA试剂还额外降低了培养的肝源鼠细胞中所存在的ApoB mRNA的量。

10.根据权利要求1～9中任一项所述的iRNA试剂，其包括使所述iRNA试剂在生物样品中稳定性得到提高的修饰。

11.根据权利要求1～10中任一项所述的iRNA试剂，其包括硫代磷酸酯或者2’-修饰的核苷酸。