[发明专利]抑制哺乳动物细胞死亡或炎症的方法

说明书

发明领域

本发明涉及外源施用的蛋白质(例如Bcl-2蛋白质)抑制细胞死亡和/或炎症的用途。

发明背景

程序性细胞死亡是哺乳动物发育的正常和必需部分。例如，人类胎儿各手指的发育需要发育中的手指之间的组织的程序性细胞死亡。然而，引起程序性细胞死亡的生物化学过程由多种疾病和损伤触发。例如，程序性细胞死亡可由创伤性损伤、中风、心肌梗塞、器官移植以及肠系膜与外周血管疾病触发。所述的程序性细胞死亡进一步破坏损伤或患病有机体的健康。

各种前述类型的疾病和损伤典型地包括当先前中断的血流恢复至活组织时产生的某些局部缺血和再灌注损伤。例如，冠状动脉的阻塞由于心脏组织暂时性缺乏血液供应可引起心肌死亡。当通过施用溶血栓药物使血流恢复至心肌时其它的肌肉可死亡。

慢性和急性炎症也可损害或杀伤哺乳动物的活细胞。例如，假以时日与肺气肿相关的炎症可引起肺部损伤。炎症可触发程序性细胞死亡，或通过某些其它的机制损伤活组织。因此，持续需要用于抑制哺乳动物细胞死亡和/或炎症的方法和组合物。

发明概述

依照前述，一方面本发明提供了用于抑制哺乳动物细胞死亡和/或炎症的方法，其中所述的方法各自包括将足以抑制哺乳动物细胞死亡和/或炎症的量的Bcl蛋白质施用于哺乳动物的步骤。本发明该方面的方法可用于，例如，治疗哺乳动物的涉及细胞死亡的损伤或疾病(如，局部缺血-再灌注损伤)，和/或治疗哺乳动物的涉及炎症的损伤或疾病(如，哮喘)。本发明该方面的方法也可用于，例如，预防性地治疗哺乳动物以防止或延迟细胞死亡和/或炎症的发作。

另一方面，本发明提供了当施用于哺乳动物时抑制细胞死亡和/或炎症的Bcl蛋白质的鉴定方法，其中本发明该方面的方法各自包括筛选多个蛋白质以鉴定当施用至哺乳动物时抑制细胞死亡和/或炎症的Bcl蛋白质的步骤。本发明该方面的方法可用于，例如，鉴定当施用于哺乳动物时抑制细胞死亡和/或炎症的Bcl蛋白质，以及可用于治疗哺乳动物的涉及细胞死亡和/或炎症的损伤或疾病的Bcl蛋白质。

另一方面，本发明提供了当施用于哺乳动物时抑制细胞死亡和/或炎症的Bcl蛋白质的鉴定方法，其中本发明该方面的方法各自包括分析由实验获得的数据的步骤，其中筛选多个蛋白质以鉴定抑制哺乳动物的细胞死亡和/或炎症的Bcl蛋白质。本发明该方面的方法可用于，例如，鉴定当施用于哺乳动物时抑制细胞死亡和/或炎症以及可用于治疗哺乳动物的涉及细胞死亡和/或炎症的损伤或疾病的Bcl蛋白质。

附图简述

当与附图一起理解时，本发明的前述方面和许多伴随的优点将更容易领会，通过参考以下的详细描述，变得更容易理解，其中：

图1显示了在骨髓细胞中表达外源性人类Bcl-2(hBcl-2)的十一只转基因小鼠血浆中肌酸激酶浓度的柱状图(在图1中标记为Bcl-2)，和在骨髓细胞中不表达外源性hBcl-2的九只非转基因(对照)C57BL/6小鼠血浆中肌酸激酶浓度的柱状图。在所述的小鼠已经经受如实施例1所描述的局部缺血-再灌注损伤后测量肌酸激酶的浓度。肌酸激酶的浓度以单位/升(U/L)表示(^*p＜0.05)。

图2显示了已经经受局部缺血-再灌注损伤的八只对照C57BL/6小鼠(在图2中标记为C57)血浆中肌酸激酶浓度的柱状图，和已经经受局部缺血损伤的八只EμT-Bcl-2小鼠(在图2中标记为EμBcl-2(T细胞))血浆中肌酸激酶浓度的柱状图(^*p＜0.05)。

图3显示了来自六只对照C57BL/6小鼠(缩写为C57)，在T细胞中表达hBcl-2的五只EμT-Bcl-2小鼠(缩写为EμT)，在B细胞中表达hBcl-2的六只EμB-Bcl-2小鼠(缩写为EμB)，和在骨髓细胞中表达hBcl-2的五只hMRP8-骨髓-Bcl-2小鼠(缩写为hMRP)的腿肌肉组织中TUNEL阳性细胞百分数的柱状图。如实施例3所描述，所有的小鼠已经经受局部缺血-再灌注损伤(^*p＜0.05，与C57相比)。

图4显示了局部缺血和再灌注后，六只小鼠(标记为tg+小鼠)血浆中肌酸激酶浓度的柱状图，该六只小鼠在局部缺血前已经接受了从在T淋巴细胞表达hBcl-2的小鼠中提取的血浆的注射。图4还显示了局部缺血和再灌注后，小鼠(标记为tg-小鼠)血浆中肌酸激酶浓度的柱状图，该小鼠在局部缺血前已经接受了从在T淋巴细胞不表达hBcl-2的六只同窝出生对照小鼠中提取的血浆的注射(^*p＜0.05)。