[发明专利]涂布膜的方法

说明书

本发明涉及往微孔膜(Membranen)涂布含有固体的反应性薄膜 (film)的方法，因此涉及生产的膜和含有它们的诊断单元。

定性或定量分析测定流体成分，特别是诸如血液之类的体液成分 时常常采用所谓的缚载体试验。在这些试验中，试剂，特别是专门的 检测试剂和辅助试剂在适当的固体载体层中被包埋或固定。这些层称 之检测元件。让该液体样品与这些检测元件接触，测定相应的分析物。 一般而言，有目标分析物，特别有颜色变化，这种颜色变化可以采用 目视方法或使用仪器，通常采用反射光度法进行分析时，该液体样品 与最初以干燥形式存在并被该样品再溶解的这些试剂进行反应产生一 种信号，其信号可以采用光学方法或电化学方法进行监测。其它的检 测方法例如是以电化学方法和检测电荷、电位或电流变化为基础的方 法。

与通常的实验室试验相反，由于这些检测试剂最初是以干燥形式 存在的，缚载体试验通常也称之“干化学试验”。

干化学试验的试验元素或试验载体通常呈测试条形式，它们基本 上由塑料材料制成的伸长载体层组成，检测元素固定在它们的上面作 为试验区域。然而，人们还知道设计成正方形或长方形干胶片的试验 载体。

一般而言，采用干化学测试条进行血液中低分子分析物的光度检 测包括分离干涉光度测量的红血球。

分析物检测需要的酶通常位于耐水的不溶薄膜中，在该薄膜中由 成膜剂构成的疏水基质含有全部或至少一些检测试剂(即基本上酶和指 示剂系统)，样品穿过这些试剂并且在这些试剂中进行生色反应。采用 各种各样的确定涂布法(例如刮刀涂布)在非吸收的机械稳定的载体材 料(例如像由双酚A聚碳酸酯制成的箔)上涂敷这些薄膜。

术语成膜剂表示能涂布成机械稳定的耐水试剂层的聚合物(例如 丙酸乙烯酯塑料分散体)。

此外，这些反应性薄膜通常含有溶胀剂。溶胀剂是水溶性聚合物， 它们充分地影响涂料软膏的粘性，这会造成这些试剂在耐水层的疏水 部分区域中细分散，并且促使样品渗透到该层中(实例是海藻酸盐、 Eudragit等)。

添加填料(还称之薄膜致孔剂)可能对“致孔度”，从而对分析物渗透 到反应性薄膜的能力有正影响(参见例如US 4 312 834)。填料是水不溶 性的、非膨胀的、易润湿的细无机或有机颗粒，它们不能使光光学散 射或只是轻微光学散射，并且甚至能使相对大的分子(例如呈脂蛋白形 式的脂类)，甚至细胞(例如红血球)渗透到耐水薄膜中。填料实例是白 垩、纤维素、硅藻土(Diatomeenerde)、Celatom、硅藻土(Kieselgur)、 硅酸等。

在第一代的血糖测试条中(例如Boehringer Mannheim的 20-800，还参见US 3 630 957)，除了检测化学之外， 反应性薄膜仅含有成膜剂()和溶胀剂(海藻酸盐)。在这些非 常密实，即没有致孔的耐擦薄膜的情况下，红血球不能渗透到反应性 薄膜中，尽管特别诸如葡萄糖之类的血液低分子量成分实际上能穿 透。因此，分开的血液分离是不必要的。打算测量血糖的血滴简单地 直接涂敷在测试条反应性薄膜上。该血滴在反应性薄膜上培育一分钟 后，擦去血液，再反应一分钟后，可以从前面已涂敷血液的这条同侧 读出显色时间作为分析物浓度的度量。

因此，第一次可能直接检测全血中的葡萄糖。由于这些反应性薄 膜不含有任何填料，它们仅允许低分子量的易溶于水的分析物，例如 葡萄糖缓慢渗透，并不能检测大而疏水的分子(例如像胆固醇(CHOL)、 HDL(高密度脂蛋白，即更高密度的脂蛋白)、三酸甘油酯(TG)、肌酸激 酶(CK)等)。

在检测全血分析物的干化学试验的发展过程中，使用玻璃纤维毛 分离红血球(其中参见US 4 816 224)，特别是与含有填料的开孔反应性 薄膜一起使用(例如Roche Diagnostics的Reflotron生产线的测试条， 以及后来Roche Diagnostics的Accutrend生产线的所谓“非擦拭试验”) 是一个里程碑。除了快得多的动力学之外，特别在该分析物渗透到检 测薄膜中、酶反应以及颜色反应方面，这些试验上层结构还能检测相 对大的疏水分子(例如CHOL、HDL、TG等)。