[发明专利]具有植酸酶活性的多肽和编码多肽的核苷酸序列

权利要求书

1.重组DNA分子，在原核或真核宿主细胞中表达时，其编码具有植 酸酶活性的多肽，其中，所述重组DNA分子由选自如下的DNA序列组成：

(a)由SEQ ID NO：5所示的成熟的野生型大肠杆菌植酸酶序列变异 得到的DNA序列，其特征在于，与野生型序列比较，在位置200或207 处的氨基酸发生突变，所述突变选自Val 200→Leu、Val 200→Pro、Val 200→Tyr、或Leu 207→Phe，

(b)由于遗传密码的简并性而与a)中序列相关的DNA序列，

其中所述重组DNA分子在合适的宿主细胞中表达时，伴随着培养上 清中所编码蛋白质活性的增加。

2.根据权利要求1的重组DNA分子，特征在于其由SEQ ID NO：1 的序列组成。

3.具有植酸酶活性的多肽，由根据权利要求1-2中任一项的重组DNA 分子编码，或通过由之转化的宿主细胞表达获得。

4.根据权利要求3的多肽，特征在于其由SEQ ID NO：2的序列组成。

5.DNA构建体，其在引入到合适的宿主细胞中时，能够控制突变的植 酸酶基因在宿主中表达，特征在于，其含有任选的启动子、任选的信号序 列和标记序列、根据权利要求1-2中任一项的DNA序列、终止子和任选的 5，和3，侧翼序列。

6.根据权利要求5的DNA构建体，其特征在于，启动子是纤维二糖 水解酶I、纤维二糖水解酶II、淀粉酶、木聚糖酶或烯醇化酶的启动子。

7.根据权利要求5的DNA构建体，其特征在于，启动子是葡萄糖淀 粉酶启动子。

8.根据权利要求5的DNA构建体，其特征在于，信号序列是任选修 饰的来自黑曲霉的植酸酶信号序列。

9.具有转化宿主细胞能力的载体，特征在于，所述载体含有根据权利 要求5的构建体。

10.根据权利要求9的载体，特征在于，它是质粒Da2pUC3，保藏号 为DSM 16396。

11.转化的宿主细胞，选自真菌、细菌和哺乳动物细胞，含有根据权 利要求1-2中任一项的重组DNA分子，并具有表达具有植酸酶活性多肽的 能力。

12.根据权利要求11的转化的宿主细胞，特征在于，其为酵母细胞。

13.根据权利要求11的转化的宿主细胞，特征在于，它属于曲霉菌属、 根霉菌属、木霉菌属、脉孢菌属、毛霉菌属或青霉菌属。

14.生产植酸酶的方法，特征在于，在有利于形成植酸酶的条件下培 养根据权利要求11或12或13的转化的宿主细胞，并分离所产生的植酸酶。

15.组合物，包含根据权利要求3或4的多肽，任选地还包含其他辅 剂。

16.权利要求15的组合物，还包含其它活性剂。

17.根据权利要求15的组合物，特征在于它是食品或饲料组合物。

18.根据权利要求15-17之任一项的组合物，特征在于组合物是烘焙 助剂。

19.根据权利要求3或4的多肽在制备改善动物和人类营养中磷利用 的制品中的用途。

20.根据权利要求3或4的多肽在改善用于生产烘焙产品的生面团的 流变学特性中的用途。