[发明专利]利用发光体K-37的脂蛋白测定无效
申请号: | 200580047864.8 | 申请日: | 2005-12-12 |
公开(公告)号: | CN101133329A | 公开(公告)日: | 2008-02-27 |
发明(设计)人: | 加雷斯·罗伊斯顿·琼斯;戴维·托马斯·克拉克 | 申请(专利权)人: | 科学技术设备委员会 |
主分类号: | G01N33/92 | 分类号: | G01N33/92;G01N35/00;G01N21/64 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 | 代理人: | 王旭 |
地址: | 英国*** | 国省代码: | 英国;GB |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 发光体 37 脂蛋白 测定 | ||
1.确定样品溶液中总脂蛋白浓度的方法,所述方法包含下列步骤:-
(i)将0.2mM-1.0mM探针物质K-37(此处定义)加入到样品的第一等分部分,所述探针物质结合样品中的脂蛋白,并且当其如此结合时在适当激发下发荧光;和
(ii)利用荧光分析确定样品中总脂蛋白浓度。
2.根据权利要求1的方法,其中加入到第一等分部分的K-37浓度在大约0.5-0.85mM之间。
3.根据权利要求1或2的方法,其中所述方法包含将配体结合抑制剂加入到第一等分部分,所述配体结合抑制剂适合于基本上抑制所述探针物质与人血清白蛋白上的疏水性结合域的结合,之后确定脂蛋白或HDL浓度。
4.根据权利要求3的方法,其中所述配体结合抑制剂包含脂肪酸或其功能衍生物。
5.根据权利要求3或权利要求4的方法,其中所述配体结合抑制剂包含辛酸(C8)或其衍生物,例如,辛酸盐(酯)。
6.根据前述权利要求任一项的方法,其中,对于每个步骤,通过在400nm-650nm的激发波长激发第一等分部分来诱导荧光,并且在约540nm-700nm之间的发射波长测量得到的荧光。
7.根据前述权利要求任一项的方法,其中所述方法还包含确定脂蛋白特定类别或亚类浓度的步骤。
8.根据权利要求7的方法,其中将第二探针物质加入到样品的第二等分部分;其中第二探针结合脂蛋白的特定类别或亚类,以致当与它们结合时所述第二探针在适当激发之下改变荧光产率;并且该荧光指示脂蛋白特定类别或亚类的浓度。
9.根据权利要求8的方法,其中脂蛋白的类别或亚类是HDL。
10.根据权利要求9的方法,其中第二探针物质是尼罗红。
11.根据权利要求10的方法,其中加入到样品的探针物质尼罗红的浓度在大约0.1-0.9mM之间。
12.根据权利要求8-11任何一项的方法,其中将根据权利要求5-7任何一项的配体结合抑制剂加入到第二等分部分。
13.根据权利要求8-12任何一项的方法,其中将封闭HSA药物结合域的试剂也加入到第二等分部分,之后确定HDL浓度。
14.根据权利要求13的方法,其中所述试剂是苯甲酸或其盐或衍生物。
15.根据权利要求10-14任何一项的方法,其中通过在400nm-650nm之间的激发波长激发第二等分部分并且在约540nm-700nm之间的发射波长测量得到的荧光来诱导荧光。
16.根据权利要求10-15任何一项的方法,其中通过在400nm-500nm之间的激发波长激发第一等分部分;在约600nm的激发波长激发第二等分部分;并且在约620nm的发射波长测量从每个等分部分得到的荧光来诱导荧光。
17.根据前述权利要求任一项的方法,其中所述样品是生物流体。
18.根据前述权利要求任一项的方法,其中所述样品包含血浆或血清,或淋巴。
19.一种装置,用于进行根据权利要求1-18任何一项的脂蛋白测定,所述装置包含:反应储器;适合于含有根据权利要求1-18任何一项方法所需试剂的容纳装置;可操作用于激发所述样品以便它发荧光的激发装置,和可操作用于检测由所述样品发射的荧光的检测装置。
20.根据权利要求19的装置,其中所述装置包含阅读器和盒,所述盒包含所述反应储器和所述容纳装置。
21.根据权利要求19或20的装置,其中所述激发装置包含照明源,可操作用于在大约460nm并且也任选在600nm照亮所述样品。
22.根据权利要求19-21任何一项的装置,其中所述检测装置在大约500nm-700nm检测由样品发射的荧光。
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