[发明专利]新型血管生成抑制因子

说明书

技术领域

本发明涉及血管生成抑制剂以及血管生成诱导剂。本发明还涉及血管生成抑制剂以及血管生成诱导剂的筛选方法和试剂盒。

背景技术

血管生成是指动物的组织或器官中，来自已有的微静脉、毛细血管的血管内皮细胞的游走、增殖以及管腔形成，生成新的血管的现象。通常，在胚胎期、幼儿期和生长期形成新的血管并伸长，但是在过了生长期后，体内发生血管生成的情形是有限定的。即，血管生成可在黄体形成、排卵、胚胎发生、胎盘形成等通常的生理条件下观察到，在损伤的治愈、炎症的修复过程中也发生。如上所述，血管生成在健康状态下发生，在组织的恢复中起重要作用。另外已明确，在心肌梗塞等缺血性心脏病或闭塞性动脉硬化、Buerger病(血栓闭塞性脉管炎)等末梢性血管疾病的治疗中，促进血管生成对治疗有效。除此之外，还有报道指出：通过骨髓细胞的移植诱导血管生成，可进行动脉硬化的治疗(参照非专利文献1)。诱导血管生成对于这些疾病的预防和治疗是重要的。

相反，已知在糖尿病等很多慢性疾病中，毛细血管增加会导致组织严重损伤。另外，在恶性肿瘤增殖时，为了获得肿瘤细胞增殖所必须的营养或氧，肿瘤细胞本身诱导血管生成促进因子进行血管的生成，通过生成的血管获得养分，肿瘤细胞进一步增殖。并且肿瘤细胞向其它器官或部位的转移时也诱导血管生成，肿瘤细胞随着血流移动。作为上述血管生成作为病因或参与病态恶化的疾病，报道有血管性疾病、炎症性疾病、眼内血管生成性疾病、生殖系统疾病、中枢神经系统疾病或恶性肿瘤等(参照非专利文献2)。抑制血管生成对于这些疾病的预防和治疗是重要的。

AK022567(SEQ ID No.1)、BC051856(SEQ ID No.3)、BC053836(SEQ ID No.5)和BC028194(SEQ ID No.7)与其所编码的蛋白质一起已在GenBank的数据库中公开。但是，关于这些基因与血管生成的相关性并未见报道。

非专利文献1：Tateishi-Yuyama，E等人.，The LANCET，360卷，427-435页(2002)

非专利文献2：Carmeliet，P等人.，Nature，407卷，249～257页(2000)

发明内容

发明所要解决的课题

本发明提供新型血管抑制因子相关的血管生成抑制剂和血管生成诱导剂。本发明的目的还在于提供使用新型血管生成抑制因子进行的血管生成抑制剂和血管生成诱导剂的有效的筛选方法，以及可简便且迅速地进行上述筛选方法的筛选用试剂盒。

解决课题的方法

本发明人等经过深入研究，结果发现：AK022567蛋白质是新型的血管生成抑制因子。还发现：由与AK022567蛋白质相同的基因得到的三个剪接变体、BC051856蛋白质(SEQ ID No.4)、BC053836蛋白质(SEQ ID No.6)和BC028194蛋白质(SEQ ID No.8)也具有血管生成抑制作用。又发现了新型剪接变体(SEQ ID No.10)。并发现：上述五种蛋白质、编码该蛋白质的多核苷酸、它们的中和抗体等可用作血管生成抑制剂或血管生成诱导剂，从而完成了本发明。

AK022567蛋白质(SEQ ID No.2)与已知的血管生成抑制因子一Vasohibin蛋白质(SEQ ID No.12：国际公开第02/090546号小册子)具有58％的同源性。

AK022567蛋白质与Vasohibin蛋白质有以下差异。

即，Vasohibin蛋白质在血管内皮细胞中可见表达，而AK022567蛋白质在血管内皮细胞中未见表达；Vasohibin蛋白质在人胚胎和人成体的脑、胎盘中可见表达，而AK022567蛋白质在人胚胎中可见表达，但在人成体的脑、胎盘等组织中未见表达。

本发明包含以下内容：

(1)血管生成抑制剂，该血管生成抑制剂含有具有选自SEQ IDNo.2、4、6、8和10的氨基酸序列的蛋白质、具有该氨基酸序列中有1或多个氨基酸缺失、置换或附加得到的氨基酸序列且具有血管生成抑制作用的蛋白质、具有血管生成抑制作用的这些蛋白质的部分肽或它们的盐。