[发明专利]新颖偶联剂及其应用

权利要求书

1.一种偶联剂，其包含六氟合磷氢酸6-氯-1-羟基苯并三唑-1-基 -N-氧基-三(吡咯烷-1-基)鏻。

2.制备六氟合磷氢酸6-氯-1-羟基苯并三唑-1-基-N-氧基-三(吡咯 烷-1-基)鏻的方法，所述方法包括：

提供六氟合磷氢酸三-(1-吡咯烷基)鏻；

提供6-氯-1-羟基苯并三唑；和

使六氟合磷氢酸三-(1-吡咯烷基)鏻与6-氯-1-羟基苯并三唑反应， 藉此得到六氟合磷氢酸6-氯-1-羟基苯并三唑-1-基-N-氧基-三(吡咯烷 -1-基)鏻。

3.权利要求2的方法，其中所述反应在碱存在下进行。鏻

4.权利要求2的方法，其中所述反应在有机溶剂存在下进行。

5.权利要求2的方法，其中提供所述六氟合磷氢酸三-(1-吡咯烷 基)鏻包括：

提供氧化三-(1-吡咯烷)膦；

将所述氧化三-(1-吡咯烷)膦转化为氯化三-吡咯烷-1-基-鏻；和

使所述氯化三-吡咯烷-1-基-鏻与六氟合磷氢酸钾反应。

6.权利要求2的方法，其中以等于或大于96％的纯度得到所述六 氟合磷氢酸6-氯-1-羟基苯并三唑-1-基-N-氧基-三(吡咯烷-1-基)鏻。

7.合成肽的方法，所述方法包括：

在六氟合磷氢酸6-氯-1-羟基苯并三唑-1-基-N-氧基-三(吡咯烷-1- 基)鏻存在下，一个接一个序惯偶联多个氨基酸，藉此得到含有所述多 个氨基酸的肽。

8.权利要求7的方法，其中所述氨基酸中至少一个选自具有仲α 胺的氨基酸、具有叔α胺的氨基酸、具有取代的α碳原子的氨基酸和 具有含氨基侧链的氨基酸。

9.权利要求7的方法，其中所述氨基酸中至少一个选自具有仲α 胺的氨基酸和具有叔α胺的氨基酸。

10.权利要求7的方法，其中所述氨基酸中至少一个为具有取 代的α碳原子的氨基酸。

11.权利要求7的方法，其中在所述肽中至少两个偶联的氨基 酸为具有取代的α碳原子的氨基酸。

12.权利要求10和11的方法，其中所述α碳被烷基取代。

13.权利要求7的方法，其中所述氨基酸中至少一个为具有含 氨基侧链的氨基酸。

14.权利要求7的方法，其中在所述肽中至少两个偶联的氨基 酸为具有含氨基侧链的氨基酸。

15.权利要求13或14的方法，其中所述具有含氨基侧链的氨 基酸为精氨酸。

16.权利要求9的方法，其中以大于10％的产率得到所述肽。

17.权利要求10和11的方法，其中以大于90％的产率得到所 述肽。

18.权利要求13和14的方法，其中以大于80％的产率得到所 述肽。

19.权利要求7的方法，其中通过固相合成来实现合成所述肽。

20.肽的粗组合物，所述肽以C-末端到N-末端方向合成，所述 组合物基本上由具有所需氨基酸序列的肽和多种具有不想要的氨基 酸序列且对于所述具有所需氨基酸序列的肽为杂质的肽组成，其中在 所述组合物中所述具有所需氨基酸序列的肽的浓度，比用六氟合磷氢 酸苯并三唑-1-基-N-氧基-三(吡咯烷-1-基)鏻作为偶联剂在同样条件下 另外制备的以所述C-末端到N-末端方向合成的肽组合物中具有所述 所需氨基酸序列的同样肽的浓度高至少5％。

21.权利要求20的肽的粗组合物，其中所述具有所需氨基酸序 列的肽包含至少一个选自以下的氨基酸残基：具有仲α胺的氨基酸残 基、具有叔α胺的氨基酸残基、具有取代的α碳原子的氨基酸残基和 具有含氨基侧链的氨基酸残基。