[发明专利]制备长链二羧酸的方法

权利要求书

1.一种由一种或多种相应的饱和烃制备一种或多种具有相同数 目碳原子的饱和二羧酸的方法，其中保持原料化合物的立体结构，该 方法包括在含所述饱和烃作为底物的液体培养基中培养粉状毕赤酵 母，其中所使用的饱和烃为十三烷，且所产生的相应的饱和二羧酸为 十三烷二酸。

2.如权利要求1所述的方法，其中所使用的饱和烃底物的浓度在 5-15％v/v之间。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述液体培养基含有金属盐和 有机辅助因子。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述培养包括在20至35℃之 间的温度下进行最多3天时间的生物化学氧化。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述饱和二羧酸通过常规手段 从培养基中回收。

6.一种生产长链二羧酸的方法，其包括在含直链烃作为底物的液 体培养基中培养能够同化直链烃的粉状毕赤酵母，以获得含有与所述 烃对应的长链二羧酸的发酵液，和回收所述饱和长链二羧酸，其中所 使用的直链烃为十三烷，且所产生的对应的长链二羧酸为十三烷二 酸。

7.如权利要求1所述的方法，其中所述培养是在需氧条件下进行 的。

8.如权利要求1所述的方法，其中所述粉状毕赤酵母在含选自正 癸烷和正十二烷并可被该微生物同化的不同碳源的液体培养基中起 始培养，随后在粉状毕赤酵母已充分生长时将十三烷加入该培养基 中，且在需氧条件下继续氧化，以产生所述饱和二羧酸。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述液体培养基的pH值在培 养的起始阶段在6.0-7.0的范围内，而在培养的后续阶段为7.0。

10.如权利要求1或8所述的方法，其中向所述液体培养基中加 入一种或多种选自H₂O₂、链烷及其混合物的产量诱导剂。

11.如权利要求1或8所述的方法，其中用己烷萃取所述液体培 养基以去除其中不需要的物质，有效地除去副产物，在发酵液中留下 所述二羧酸，随后向发酵液中加入选自氢氧化钠和氢氧化钾的碱溶液 以调节溶液的pH值至10-13，从而使所述二羧酸溶解在所述发酵液 中，随后用选自盐酸、硫酸、磷酸和溴酸的无机酸调节发酵液的pH 值至pH2以沉淀溶解的二羧酸，随后用醚提取该二羧酸。

12.如权利要求11所述的方法，其中向发酵液中加入选自氢氧化 钠和氢氧化钾的碱溶液调节溶液的pH值至11-12。

13.如权利要求1-9所述的方法，包括在生长培养基中生长粉状 毕赤酵母的步骤，其中所述用于粉状毕赤酵母生长的培养基包含3.0g 酵母提取物、3.0g麦芽提取物、5.0g蛋白胨、10g葡萄糖和1L蒸馏 水，pH为7.0。

14.如权利要求1-9所述的方法，包括测试二羧酸的中间产生的 步骤，其中用于测试二羧酸的中间产生的培养基包含10g (NH₄)₂HPO₄、2g K₂HPO₄、0.3g MgSO₄、10mg FeSO₄·7H₂O、8mg  ZnSO₄·7H₂O、8mg MnSO₄、9ml十三烷和900ml蒸馏水，pH为7.0。