[发明专利]一种合成方式及其产物的用途

说明书

                        技术领域

本发明涉及利用多肽合成的方法将一项蛋白质的功能片段制备成为多项并列联接的蛋白质功能片段多肽产物的方式，利用本方式制备的合成产物可作为药物进入体内具有耐降解，提高蛋白质功能片段在体内的生物学活性的作用。本发明属于医药领域。

                        技术背景

由于人类基因组计划的完成和人类蛋白组计划的开展，将会有越来越多的蛋白质功能片段被发现并被作为药物应用到医药领域中来。现已开发并在临床上得到应用的多肽药物有“催产素”、“胸腺肽α1”、“胸腺五肽”等，有在天然肽链的基础上进行人工改构制备成为用于治疗消化道出血和肢端肥大症的多肽药物“奥曲肽”等。蛋白质中的功能片段常常能筛选到含有三十几个或小到只有三个氨基酸组成的多肽片段，它们为人工合成蛋白质功能片段并将它们投入应用奠定了基础。由于筛选和鉴定出的蛋白质功能片段多为直链短肽，如果将它们直接投入应用作为药物进入体内后会被体内的多种酶很快地降解而失去其效用，因此很多天然多肽片段需要进行结构改造以提高其在体内的生物活性和延长其作用半衰期。

                        发明内容

蛋白质的功能片段是指被发现具备某种特定生物学功能的小分子多肽片段，它们通常是三十几个至三个氨基酸组成的多肽片段，被鉴定和发现的蛋白质功能片段可通过人工合成的途径制备。直链多肽小分子物质作为药物进入体内后易降解而难以达到预期的药效。为了达到保留蛋白质功能片段的生物学活性、提高药效、延长其在体内代谢的半衰期，需要对蛋白质功能片段做结构设计上的改进。将一项蛋白质功能片段制备成为多项并列联接的功能片段多肽产物，达到将功能片段有效地聚集并能够在一定程度上抵抗体内蛋白酶的降解，作为药物有助于提高疗效，延长给药间隔，减少病人的给药次数。按照此方式开发制备的多肽药物在体内的最终降解产物为游离氨基酸，可被机体直接吸收，没有药物残留和毒副作用，作为药物安全性好。应用本方式产生的蛋白质功能片段多肽产物作为药物将具有重要的开发潜力和应用价值。

                具体药物设计方式

多肽合成常用的方法为固相合成法，多肽合成的原理是根据氨基酸两端的氨基和羧基之间的缩合反应形成酰胺键(肽键)连接延长肽链。首先将多肽片段的羧基端氨基酸的羧基与固相树脂共价相连，合成的顺序是从肽段的羧基端(C-端)向氨基端(N-端)方向延长，多肽合成完成后再将合成的多肽产物从固相树脂上裂解下来，经过纯化得到合成产物。可采用如下方式合成含有蛋白质功能片段的多肽药物：

在合成功能肽段之前首先将赖氨酸(Lys)或精氨酸(Arg)与固相树脂联接，一个赖氨酸或精氨酸有两个氨基可供缩合联接氨基酸并延长肽链。现以赖氨酸为例，在赖氨酸的2个氨基上可以继续往下连接氨基酸或延长肽链，可将赖氨酸序列连接起来形成如下结构序列的多肽产物：

(蛋白质功能片段)₂-Lys                 蛋白质功能片段2项并列联接。

(蛋白质功能片段)₄-(Lys)₂-Lys          蛋白质功能片段4项并列联接。

(蛋白质功能片段)₈-(Lys)₄-(Lys)₂-Lys    蛋白质功能片段8项并列联接。

(蛋白质功能片段)₁₆-(Lys)₈-(Lys)₄-(Lys)₂-Lys    16项并列联接。或：

(蛋白质功能片段)₂-Arg                  蛋白质功能片段2项并列联接。

(蛋白质功能片段)₄-(Arg)₂-Arg           蛋白质功能片段4项并列联接。

(蛋白质功能片段)₈-(Arg)₄-(Arg)₂-Arg    蛋白质功能片段8项并列联接。

(蛋白质功能片段)₁₆-(Arg)₈-(Arg)₄-(Arg)₂-Arg    16项并列联接。