[发明专利]鸡肾型传染性支气管炎HN99株病毒无效
申请号: | 200610018065.4 | 申请日: | 2006-07-03 |
公开(公告)号: | CN101100656A | 公开(公告)日: | 2008-01-09 |
发明(设计)人: | 崔保安;舒德广;张素梅;高文明;王莉;徐端红;魏战勇;王学斌 | 申请(专利权)人: | 河南农业大学 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;C12R1/93 |
代理公司: | 郑州联科专利事务所 | 代理人: | 田小伍;张秋红 |
地址: | 450002*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鸡肾型 传染性 支气管炎 hn sub 99 病毒 | ||
技术领域
本发明涉及一种家禽传染性病毒,尤其涉及一种鸡肾型传染性支气管炎病毒。
背景技术
1999年,河南省荥阳某养鸡场爆发以呼吸道症状为临床特征、以肾脏肿胀、尿酸盐沉积为解剖特征的传染病,从鸡群典型病例的肾脏和输尿管中分离到一株病毒,代号为HN99株。通过SPF鸡胚传代,SPF雏鸡回归复壮后,测定其EID50为10-6.40/0.1ml;我们对发病鸡的肾脏进行了组织学观察,用电镜观察了该病毒的冠状病毒粒子的形态和大小,进行了生物学特征试验如血凝性、对NDV的干扰试验,测定了对热、酸、化学试剂(氯仿、乙醚等)的敏感程度和其他理化试验。用Holte、Gray和Ausc-T等国际古典肾型病毒株和河南、湖北、北京、天津、哈尔滨等地方毒株等进行了特异性试验和血清中和试验。试验结果证实该病毒株为肾型传染性支气管炎病毒,HN99病毒株与传统的呼吸型传染性支气管炎病毒M41株、H120株、H52株的血清型不同,是一株新的病毒株。用传统的M41株或H120株、H52株制备的疫苗不能预防HN99株病毒所致的肾型传染性支气管炎,只有用HN99株病毒制备的疫苗才能预防肾型传染性支气管炎。
发明内容
本发明目的在于提供一种新型的鸡肾型传染性支气管炎HN99株病毒。
本发明公开了一种新型的鸡肾型传染性支气管炎HN99株病毒,该病毒株于2006年5月26日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.1729。
该病毒具有以下特征:
(1)、在电镜下见有冠状病毒粒子,直径90~105nm,有囊膜,周围有长约18nm的梨状突出,呈放射状排列;
(2)、发病鸡症状除呼吸道症状外,大部份死鸡均有肾脏肿大、尿酸盐沉积、花斑肾等病变,用10日龄鸡胚接种病毒,并经盲传5代后,可见24~72小时之间死亡的鸡胚均有充血或出血、孵育至第17天的鸡胚有3/5呈现发育小、蜷曲、僵化、尿酸盐沉积;
(3)、病毒分离物对NDV La Sota株病毒的繁殖产生干扰;
(4)、病毒分离物对1%鸡红细胞不产生凝集;
(5)、回归SPF鸡试验可出现呼吸道症状和肾肿、花斑肾等病变;
(6)、特异性血清中和结果证明,病鸡的病毒分离物与HN99阳性血清呈阳性反应,而与NDV La Sota株、IBDV B87株、AIV H9N2株均呈阴性反应;
(7)、将HN99株阳性血清与100个EID50的M41株、Holte株、Gray株、T株和地方分离株湖北株、哈尔滨株、山东株、北京株、上海株、天津株等病毒做血清中和试验,结果显示,HN99株阳性血清与T株、湖北株、天津株和山东株呈阳性反应,与其他株病毒均呈阴性反应。
本发明所述的鸡传染性支气管炎病毒株于2006年5月26日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏单位简称:CGMCC,保藏编号:CGMCC No.1729,分类命名:鸡肾型传染性支气管炎病毒,英文名称为Avain nephropathogenic Infectious bronchitis virus HN99 Strain,拉丁文名称为Tarpeianephrite pulli,保藏单位地址:北京市海淀区中关村北一条13号,邮编:100080。
具体实施方式
本发明采用以下方法进行病毒的分离、培养、鉴定:
(一)、病毒分离培养
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