[发明专利]对白细胞进行分类的试剂及方法

权利要求书

1.一种用于对白细胞进行分类的试剂，所述分类是将白细胞分成与淋巴细胞、单核细胞、嗜酸粒细胞分别对应的3个集团，以及与中性粒细胞和嗜碱粒细胞相对应的1个集团共计4个集团，其特征在于，所述试剂包括：

a.能够溶解红细胞，且使白细胞的细胞膜部分损伤的至少一种表面活性剂，所述至少一种表面活性剂是指选自非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂及两性表面活性剂中的一种或几种的组合，但不包括阳离子表面活性剂与阴离子表面活性剂的组合，也不包括非离子表面活性剂与阳离子表面活性剂的组合，

b.能够与白细胞内阳离子结合，使白细胞之间产生形态差异的至少一种带阴离子基团的有机化合物，

c.能够将pH值调整在2～8范围内的缓冲剂；

并且当所述至少一种表面活性剂为阴离子表面活性剂与非离子表面活性剂的组合时，所述缓冲剂的pH范围为2～4.5；

所述非离子表面活性剂为具有式I所示结构的非离子表面活性剂，

R₁-R₂-(CH₂CH₂O)_n-H    I

其中，R₁为C原子数8到23的烷基或链烯基，R₂为-O-或-COO-，n为8-30的整数；

所述阳离子表面活性剂为具有式II所示结构的季铵盐型阳离子表面活性剂，

其中R₃为C原子数6-14的烷基或链烯基；R₄及R₅为原子数1-4的烷基或链烯基；R₆为C原子数为1-4的烷基或链烯基或苄基；X为卤素原子；

所述阴离子表面活性剂为十二烷基磺酸钠，或者是具有式III所示结构的阴离子表面活性剂，

R₇-R₈-(CH₂CH₂O)_n-Y    III

其中，R₇为C原子数8到22的烷基、链烯基或炔基，R₈为-O-或-COO-，n为8-30的整数，Y为-SO₃Na，-COONa，-OSO₃Na，或-ONa；

所述两性表面活性剂为具有式IV所示结构的两性表面活性剂，

其中，R₉为C原子数6-14的烷基或链烯基；R₁₀及R₁₁为原子数1-4的烷基或链烯基。

2.根据权利要求1所述的一种用于对白细胞进行分类的试剂，其特征在于：所述试剂进一步包括作为助溶剂的醇类。

3.根据权利要求1所述的一种用于对白细胞进行分类的试剂，其特征在于：所述带阴离子基团的有机化合物为酸性有机色素。

4.一种采用权利要求1～3中任意一项所述的试剂对白细胞进行分类的方法，其特征在于：所述方法包括步骤，将所述的试剂加入到全血样本中，使白细胞分成与淋巴细胞、单核细胞、嗜酸粒细胞分别对应的3个集团以及与中性粒细胞和嗜碱粒细胞相对应的1个集团共计4个集团，然后通过测定细胞大小和形态信息对所分成的四个集团进行分类计数。

5.根据权利要求4所述的一种对白细胞进行分类的方法，其特征在于：所述分类过程中的反应温度为10～40℃。

6.根据权利要求5所述的一种对白细胞进行分类的方法，其特征在于：所述分类过程中的反应温度为35℃。

7.根据权利要求5所述的一种对白细胞进行分类的方法，其特征在于：所述测定细胞大小信息利用激光散射法采用低角度散射光完成，测定角度为2-6度；所述测定细胞形态信息利用激光散射法采用高角度散射光完成，测定角度为8-20度。