[发明专利]核苷酸分子SR1B及其在制备抗糖尿病药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种核苷酸分子及其在制备抗糖尿病药物中的应用。

背景技术

糖尿病(diabetes mellitus)是一组由遗传和环境因素相互作用而引起的临床综合征。因胰岛素分泌绝对或相对不足以及靶组织细胞对胰岛素敏感性降低，引起糖、蛋白、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱。临床以高血糖为主要标志，久病可引起多个系统损害。病情严惩或应激时可发生急性代谢紊乱如酮症酸中毒等。

糖尿病主要临床类型胰岛素依赖型糖尿病(IDDM，I型)可发生在任何年龄，但多发生于青幼年。临床特点是起病急，多食、多尿、多饮、体重减轻等症状较明显，有发生酮症酸中毒的倾向，必须依赖胰岛素治疗维持生命。起病初期血中胰岛细胞自身抗体阳性率高。口服葡萄糖胰岛释放试验可见基础胰岛素水平低于正常，葡萄糖刺激后胰岛素分泌曲线低平，显示胰岛素缺乏。

非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM，II型)也可发生在任何年龄，但多见于40岁以后中、老年。大多数病人起病缓慢，临床症状相对较轻或缺如。无酮症酸中毒倾向，但在一定诱因作用下，也可发生酮症酸中毒或高渗性昏迷。依赖胰岛素，但在饮食和口服降糖药治疗效果欠佳时，或因并发症和伴发病的存在，有时亦需要用胰岛素控制高血糖。

然而，到目前为止，尚未有人报道用于抗糖尿病的基因药物。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于制备抗糖尿病药物的核苷酸分子。

本发明的另一个目的是提供上述核苷酸分子的应用。

本发明提供了一种分离出的核苷酸分子，它的序列包括：GAUCGUCAACCGUGAGAAG。称为SR1B。

在本发明中，术语“核苷酸分子SR1B”指具有抑制BRSK2蛋白活性或者增加胰岛素分泌量，并且含有与GAUCGUCAACCGUGAGAAG序列高度同源的核苷酸序列。该术语还包括与GAUCGUCAACCGUGAGAAG的同源性至少70％，较佳地至少80％，更佳地至少90％的核苷酸序列。

该术语还包括GAUCGUCAACCGUGAGAAG的核苷酸序列变异形式。这些变异形式包括(但并不限于)：若干个(通常为1-15个，较佳地1-10个，更佳地1-5个)核苷酸的缺失、插入和/或取代，以及在5’和/或3’端添加数个(通常为10个以内，较佳地为5个以内)核苷酸。例如，在GAUCGUCAACCGUGAGAAG后(3‘端)加入若干dT(脱氧胸苷)后形成的序列。

在本发明中，可在SR1B后(3‘端)连接dTdT，从而形成GAUCGUCAACCGUGAGAAGdTdT。

在本发明还提供了核苷酸分子，其序列包括GAUCGUCAACCGUGAGAAG和AAAGCUGUUCUUGAUGGAG。

在本发明还提供了核苷酸分子，其序列包括GAUCGUCAACCGUGAGAAGdTdT和dTdT CUUCUCACGGUUGACGAUC。

本发明还提供了一种载体，它含有上述的核苷酸分子SR1B。

在本发明中，可选用本领域已知的各种载体，如市售的载体。比如，选用市售的载体，然后将含有本发明SR1B核苷酸序列的GAUCGUCAACCGUGAGAAGdTdT可操作地连于表达调控序列，可以形成重组载体。

如本文所用，“可操作地连于”指这样一种状况，即线性DNA序列的某些部分能够影响同一线性DNA序列其他部分的活性。例如，如果信号肽DNA作为前体表达并参与多肽的分泌，那么信号肽(分泌前导序列)DNA就是可操作地连于多肽DNA；如果启动子控制序列的转录，那么它是可操作地连于编码序列；如果核糖体结合位点被置于能使其翻译的位置时，那么它是可操作地连于编码序列。一般，“可操作地连于”意味着相邻近，而对于本发明的核酸分子则意味着相邻且不影响功能。

本发明还提供了上述核苷酸分子SR1B的宿主细胞。

在本发明中，术语“宿主细胞”包括原核细胞和真核细胞。常用的原核宿主细胞的例子包括大肠杆菌、枯草杆菌等。常用的真核宿主细胞包括酵母细胞，昆虫细胞、和哺乳动物细胞。较佳地，该宿主细胞是真核细胞，如CHO细胞、COS、NIT细胞等。

另一方面，本发明还提供了上述的核苷酸分子SR1B的制备方法，即按GAUCGUCAACCGUGAGAAG的序列，将各核糖核酸分子依次脱水缩合。

本发明的核苷酸分子SR1B可以采用各种常规的制备方法制备。本发明的核苷酸分子SR1B序列通常可以用酶解法或人工合成的方法获得。