[发明专利]一种分离和纯化重组腺相关病毒载体的方法无效
申请号: | 200610032512.1 | 申请日: | 2006-11-02 |
公开(公告)号: | CN101173300A | 公开(公告)日: | 2008-05-07 |
发明(设计)人: | 孙小娟 | 申请(专利权)人: | 孙小娟 |
主分类号: | C12N15/861 | 分类号: | C12N15/861 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 410078湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 分离 纯化 重组 相关 病毒 载体 方法 | ||
【权利要求书】:
1.一种快速高效分离和纯化重组腺相关病毒载体的方法。其过程是:
1.氯仿处理裂解细胞,加入1/10细胞悬液体积的氯仿,37℃摇床中剧烈振摇1小时。
2.用1mol/L NaCl/10%PEG对腺相关病毒进行浓缩。
3.氯仿抽提除去残留的PEG及蛋白质,振摇溶解后冰浴放置1小时。
4.透析去除病毒液中残留的无机盐,将病毒液至于2LPBS溶液中,4℃过夜。
5.将病毒液用旋转蒸发仪4℃蒸发2小时,去除残留的微量氯仿。
6.浓缩柱浓缩病毒液,3000转/分离心,浓缩为500μL,提高病毒的滴度。
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