[发明专利]一种绵羊胸腺肽的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于药品制备技术领域，特别涉及羊胸腺肽的制备工艺。

背景技术

有关胸腺肽的研究开始于20世纪60年代，是胸腺组织上皮细胞分泌的多肽激素。1961年Miller和Archer分别在小鼠和家兔中发现胸腺对淋巴细胞的分化、成熟和免疫活性的获得有重要的作用，此后许多学者相继从人胚胸腺、小牛、绵羊、猪等的胸腺或血清中分离得到胸腺肽混合物；不同来源的胸腺肽的组分、理化性质、生物活性等没有显著性差别。1972年，Golden从小牛胸腺中分离出胸腺肽组分5(TF5)；后经等电聚焦电泳获得α_1-10(PI＜5.0)、β_1-5(5.0＜PI＜7.0)、γ(PI＞7.0)3个区，15条多肽(刘治军等，胸腺肽研究进展及临床应用，首都医药，2003，10910)：40)。近几年，国外研究机构对TF5进行了纯化及生物化学性质方面的研究，已证实有生物活性的单肽为α1、α5、α7、β3、β4(Edward Hhannappel et al，TheThymosins：Prothymosins α，Parathymosins，andβ-thymosins：Structure andFunction，Vitamins and Hormones，2003，66(1)：257)，目前已有单一的胸腺肽以基因工程的方式生产，如α1。虽然利用基因工程生产单一的胸腺肽已经应用于临床，但是从胸腺提取的胸腺肽混合物仍然有其优势，因为不同胸腺肽成分对不同的免疫细胞及其不同的发育阶段的作用是不同的(Bela Bodeyet al，Rewiew of thymic hormones in cancer diagnosis andtreatment，International Journal of Immunopharmacology，2004，4(4)：539)。

胸腺肽已经被广泛地应用于临床，主要用来治疗乙肝、丙肝等感染性疾病；非小细胞肺癌、恶性黑色素瘤、肝癌、胃癌等恶性肿瘤；自身免疫性疾病，如重症肌无力、全身性红斑狼疮、类风湿性关节炎；也用于皮肤病、过敏性紫癜、肺结核、上呼吸道感染等疾病的治疗。还可延缓和预防中老年人胸腺生理性退变，有防衰老的作用。

除临床上应用最广的是胸腺肽外。动物胸腺中还有多种多肽类激素，总称为胸腺激素。已由小牛胸腺分离精制的胸腺激素有胸腺素(Thymosin)、胸腺体液因子(Thymus humoral factor)、胸腺生成素(thymopoietin)和胸腺因子(Thymic factor)等。

胸腺肽的药理作用可概括为以下几方面：1.诱导和促进胸腺依赖性T淋巴细胞分化和成熟。2.增强巨噬细胞的吞噬功能和抗原提呈能力。3.提高白细胞介素-2的产生水平并增强其受体的表达水平和受体亲和力。4.在肿瘤坏死因子存在或不存在的条件下，胸腺肽α1可促进骨髓来源的树突状细胞成熟分化并增强其功能。6.胸腺肽α1具有调节海马神经元突触传递的作用。胸腺肽对免疫系统的作用途径有两个：一是通过形形色色的神经内分泌通路，改变激素水平，其作用主要表现为调节下丘脑-垂体-肾上腺轴，从而间接地作用于宿主的防御机制；二是直接介入免疫系统中发挥作用。此外，它还能调节糖皮质激素的分泌，这说明它可以抗应激作用。还发现胸腺肽具有抗衰老作用。

综上所述，胸腺肽作为一种较强的生物反应调节剂，已经在医学临床和兽医临床的疾病预防与治疗中发挥了越来越重要的作用，尤其是“非典”疫情出现以后，胸腺肽在其治疗中起了很大作用，从而引起了人们越来越多的关注，促进了胸腺肽制剂的广泛开发与应用。

目前，临床上应用的胸腺肽，除基因工程胸腺肽单组分外，都是从猪和牛的胸腺提取的、含有多种组分的胸腺肽。在1987年，谢家麒等人提取绵羊胸腺生成素(Thymopoietin，TP)，而不是胸腺肽(谢家麒等，绵羊胸腺肽类提取物的制备及其临床应用的研究，中国兽医科技，1987，1：16-19)。到目前为止，还没有用绵羊胸腺生产胸腺肽的。

目前胸腺肽的生产工艺为：

1、原料处理：将动物胸腺组织剔除筋膜，漂洗后用绞肉机和匀质器破碎组织，加2倍体积双蒸水，反复冻融2、3次。每次-20℃贮存48小时以上。

2、将提取液加热到85℃，10分钟。离心去除沉淀蛋白。

3、离心液用截留分子量为1万的超滤柱进行超滤。

4、测定多肽含量，定溶。

5、过滤除菌制成水针剂或加赋形剂冻干。

发明内容