[发明专利]SEC2超抗原基因工程肽及其编码基因和异源表达方法

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程肽的基因克隆和异源表达，具体说是一系列具有SEC2超抗原活性的基因工程肽、及其编码基因的制备和异源表达。

背景技术

超抗原(superantigen，SAg)是一组由细菌或病毒编码的蛋白质分子，可以极低浓度(1～10ng/mL)刺激大部分T细胞增生，具有超强的增强机体免疫反应功能和一定的抗肿瘤活性。因此，超抗原是一种极好的免疫调节剂和增效剂，可望被开发成潜在的新型抗肿瘤药物，用于肿瘤治疗。

金黄色葡萄球菌肠毒素(Staphylococcal enterotoxins，SEs)是一类具有代表性的微生物外毒素。由于其极强的T细胞激活功能，成为一类典型微生物超抗原，受到人们的广泛重视。近年来，人们在对金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)结构、免疫学功能及其抗肿瘤等进行了大量研究工作，其中主要集中在对SEA/SEB等的研究方面。  我所在世界上首次对SEC2的基因进行了克隆、测序并在靶向融合蛋白研究方面取得了开创性成果，为进一步开展肠毒素C2(SEC2)分子改造及其靶向融合蛋白的研发奠定了基础。

实验肿瘤学研究显示利用SEC2作为肿瘤治疗的超抗原药物具有其它药物不可比拟的优点：SEC2较能抗消化并且耐热以及只需使用很小的剂量就可引发T细胞应答和明显的肿瘤抑制效应。尽管如此，在临床使用过程中还不完全尽如人意。1)作为潜在肠胃毒素可引起伴随着呕吐和严重腹泻等毒副作用；2)SEC2超抗原对肿瘤细胞作用位点缺乏靶向性，在增强机体免疫功能抑制肿瘤细胞生长的同时，可能对人体正常细胞产生细胞毒作用；剂量过大或应用不当亦可产生免疫耐受；3)作为潜在的临床开发药物，超抗原SEC2分子量过大(约为27.6kD)，不易于静脉注射和人体吸收。这些问题限制了其在临床上的应用。因此，如何避免不利义素因素，充分利用其强大的免疫功能，对于探索SEC2在抗肿瘤、甚至抗病毒中的作用，具有非常重要的意义。

针对超抗原SEC2实际临床应用中所面临的毒性效应、缺乏靶向性以及分子量偏大等问题，本发明根据金黄色葡萄球菌基因组、生物信息学等理论，利用现代分子生物学技术实现SEC2蛋白分子的定向改造，以获得一系列具有超抗原活性的基因工程多肽，这种经遗传改造的超抗原基因工程肽对于扩大其临床应用范围，改善疗效、降低毒副作用具有重要的实践意义，具有潜在的开发应用前景。

发明内容

本发明涉及SEC2超抗原基因工程肽及其编码基因和异源表达方法，其为一系列具有超抗原活性的基因工程肽，利用本发明可以在人工控制的条件下，大量获得高纯度的具有超抗原活性的基因工程肽。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

SEC2超抗原基因工程肽分别为下列任意氨基酸序列之一，

SEC2-1具有序列表SEQ ID NO：2中氨基酸序列；

SEC2-2具有序列表SEQ ID NO：4中氨基酸序列；

SEC2-3具有序列表SEQ ID NO：6中氨基酸序列；

SEC2-4具有序列表SEQ ID NO：8中氨基酸序列；

SEC2-5具有序列表SEQ ID NO：10中氨基酸序列；

SEC2-6具有序列表SEQ ID NO：12中氨基酸序列；

SEC2-7具有序列表SEQ ID NO：14中氨基酸序列；

SEC2-8具有序列表SEQ ID NO：16中氨基酸序列；

SEC2-9具有序列表SEQ ID NO：18中氨基酸序列；

SEC2-10具有序列表SEQ ID NO：20中氨基酸序列；

SEC2-11具有序列表SEQ ID NO：22中氨基酸序列；

SEC2-12具有序列表SEQ ID NO：24中氨基酸序列；

SEC2-13具有序列表SEQ ID NO：26中氨基酸序列；

或SEC2-14具有序列表SEQ ID NO：28中氨基酸序列。

所述基因工程肽的编码基因分别对应于下列核苷酸序列之一，

SEC2-1对应的基因具有序列表SEQ ID NO：1中碱基序列；

SEC2-2对应的基因具有序列表SEQ ID NO：3中碱基序列；

SEC2-3对应的基因具有序列表SEQ ID NO：5中碱基序列；

SEC2-4对应的基因具有序列表SEQ ID NO：7中碱基序列；

SEC2-5对应的基因具有序列表SEQ ID NO：9中碱基序列；