[发明专利]20(R)－25－羟基－达玛烷型－3β,12β,20－三醇的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及结构式一种原人参二醇衍生物20(R)-25-羟基-达玛烷型-3β，12β，20-三醇[简称20(R)-25-OH-PPD]的制备方法。其制备方法包括A：硅胶层析法；B：碱水解法，经过酸中和、有机溶剂萃取及硅胶柱层析分离后得到20(R)-25-OH-PPD白色结晶；C、酸水解I法，经过碱中和、有机溶剂萃取及硅胶柱层析分离后得到20(R)-25-OH-PPD；D、酸水解II法，加水沉淀，水洗至中性的沉淀经硅胶柱层析分离后得到20(R)-25-OH-PPD白色结晶。

背景技术

1979年，日本学者Odashima等人发现人参皂苷Rh₂在体外能抑制肺癌细胞3LL(小鼠)、莫里斯肝细胞(兔子)、B-16恶性肿瘤(小鼠)和HELA细胞(人)的增殖，并证明人参皂苷能引起癌细胞向正常细胞转化。1991年，日本学者Kikuchi等人报道，给裸鼠口服人参皂苷Rh₂可明显抑制人类卵巢癌(HRA)的增生。小鼠的生存率显著上升(对照组124天，治疗组198天)1995-1996年，日本学者Kitagawa等人报道，人参皂苷Rg₃可以抑制由bombesin所致大鼠肠癌腹腔内转移的作用。Azuma等报道了20(S)、20(R)人参皂苷Rg₃和Rb₂在体内体外对B16-BL6肿瘤细胞在肺部的转移有抑制作用。1998年，日本学者Nakata等人报道，口服人参皂苷Rh₂(0.4-1.6mg/kg/天)不仅可以抗HRA肿瘤，而且可延长裸鼠生存期(对照组60天，治疗组85天)。天然皂苷肠道菌群代谢转化的研究表明：由于肠道菌群对糖苷键的水解能力极强，大多数天然皂苷入血成分为其次级苷或苷元。多种天然二醇组人参皂苷均报道有抗肿瘤作用，包括：Rg₃，Rh₂，Rb₁等等。这些皂苷最终体内代谢产物均为Compound K(以下简称C-K)或原人参二醇(以下简称PPD)。由此，人们联想：是否C-K或原人参二醇为二醇组人参皂苷抗肿瘤的活性代谢产物。换言之，Rg₃，Rh₂可能为抗肿瘤天然前体药物。因此，探讨C-K或原人参二醇的抗肿瘤作用有可能会较Rg₃或Rh₂具有更大的价值。但由于C-K和原人参二醇大量获取的困难，有关这两个化合物的临床前评价尚未见系统报道。2001年11月份，在韩国召开人参皂苷抗肿瘤国际学术研究会，会上，日本著名学者柴田承二作了有关人参皂苷及三萜皂苷抗肿瘤活性的综述报告。二醇组皂苷和原人参二醇衍生物的抗肿瘤的临床价值已引起高度重视。

综上所述，人参皂苷Rg₃、Rh₂和原人参二醇衍生物，均有作为潜在抗肿瘤药物开发的可能性，但这些皂苷天然含量极低，例如：Rg₃在白参中的含量仅为0.0003％，在红参中的含量约为0.03％，而Rh₂和20(R)-羟基-3β，12β，20，25-三醇在天然人参中并不存在，仅在红参中含有Rh₂约0.001％。而原人参二醇和其衍生物的含量更为稀少。因此，采用化学方法或生物学方法转化上述稀有人参皂苷将具有重要意义。

20(R)-25-OH-PPD化学结构式如下所示：

发明内容

本发明的目的是提供20(R)-25-羟基-达玛烷型-3β，12β，20-三醇的制备方法。

本发明的目的是这样实现的：

A、硅胶层析法，用70％乙醇提取、大孔吸附树脂纯化后的人参果总皂苷，经氯仿萃取、硅胶柱层析及反相硅胶柱层析分离后得到20(R)-25-OH-PPD，收率0.1-1.0％。

B、碱水解法，即将人参总皂苷溶解于碱性有机溶剂中进行碱水解，然后经过酸中和、有机溶剂萃取及硅胶柱层析分离后得到20(R)-25-OH-PPD白色针状结晶，收率1-50％。

C、酸水解I法：人参总皂苷溶解于酸性水溶液中进行超声酸水解，然后经过碱中和、有机溶剂萃取及硅胶柱层析分离后得到20(R)-25-OH-PPD白色针状结晶，收率1-50％。

D、酸水解II法：即人参总皂苷溶解于酸性有机溶液中进行超声酸水解，然后加水沉淀，水洗至中性的沉淀经硅胶柱层析分离后得到20(R)-25-OH-PPD，收率1-80％。