[发明专利]一种交联透明质酸钠眼植入凝胶的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，涉及一种交联透明质酸钠(sodium hyaluronate，以下简称SH) 凝胶的制备方法及在制备眼部植入材料中的应用。

背景技术

透明质酸(hyalouronic acid，以下简称HA)是由(1-β-4)D-葡糖醛酸和(1-β-3)N- 乙酰基-D-氨基葡糖双糖单位重复连接组成的一种链状聚阴离子黏多糖，是构成皮肤、玻璃体、 关节滑液和软骨组织的重要成分，具有独特的理化性质和生物学功能。商品多用HA的钠盐， 即SH。SH可以作为黏弹剂用于眼科手术和骨科手术，治疗骨性关节炎和类风湿性关节炎以 及预防术后粘连，也可以作为一种药物媒介应用于多种药物制剂。天然的SH具有良好的生 物相容性，但它在组织中易被降解和扩散、体内存留时间较短，经修饰和交联后得到的衍生 物可弥补这一缺陷。Prestwich等(Pharm Sci Technol Today，1998，1：42～43.&J Controlled Release，1998，53：93～103.)曾对HA酰肼衍生物的制备及其抗酶解性进行研究，使用己二酸 二酰肼(adipic dihydrazide，以下简称ADH)修饰HA目前主要用于合成HA-链系药物，即 ADH一端与HA结合，另一端游离的酰肼基与药物结合。如专利WO9515168公开了酰肼功 能化HA及其与一些双功能连接剂的合成方法，US2003114406、WO03006068、US2004234497 和WO0206373等公开了HA-链系药物的合成及其在治疗心肌缺血、骨关节炎、干眼症、肿 瘤和伤口愈合等方面的应用。

US6383219公开了一种使用环氧树脂交联SH的凝胶应用于青光眼手术植入，作用是保 持房水滤过通道，在这项技术中，在特定的反应条件下，交联产物形成大块的凝胶，经过纯 化后被精密切割成需要的形状，例如厚度0.5mm、高5mm、底边3.5mm的三角形凝胶块或 类似大小的梯形凝胶块。在生产中，由于产品厚度要求较薄，凝胶又具有一定的柔韧性，要 切割厚度均一且无破损的凝胶块，需要借助精密的仪器设备才能完成。

目前，使用酰肼化合物交联SH制备应用于眼植入的凝胶还未见资料公开报道。本发明 采用酰肼化合物交联SH制备了眼植入凝胶，简化了产品生产步骤，无需精密切割设备，人 工即可切割得到均一厚度的产品。

发明内容

本发明的目的是提供一种交联SH凝胶的制备方法及其使用该方法制得的凝胶在制备眼 部植入材料中的应用。

本发明交联SH眼植入凝胶的制备方法包括如下步骤：

①将SH和酰肼化合物溶于pH3.5～5.5的缓冲溶液；

②将碳二亚胺溶于pH3.5～5.5的缓冲溶液；

③在步骤①得到的溶液中加入步骤②得到的溶液，混合均匀后灌入两个平板之间的缝隙， 反应形成凝胶；

④收集步骤③得到的凝胶，纯化，切割，包装，灭菌制得成品。

在上述的步骤①和②中，缓冲溶液可以是三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲液， 也可以用双[三(羟甲基)]氨基甲烷-盐酸(Bis-Tris-HCl)缓冲液。

在上述的步骤③中，所述平板可以是表面光滑的玻璃板，也可以是表面光滑的无毒塑料 板，两个平板之间的缝隙可以根据需要调节在0.2～5mm之间。

本发明制备方法中使用的SH可以选用提取法生产的产品，也可以选用发酵法生产或其 他方式生产的产品，产品的平均分子量可以是10万～300万道尔顿，优选平均分子量为20 万～150万道尔顿的产品，更优选平均分子量为20万～60万道尔顿的产品。

本发明制备方法中使用的酰肼化合物可以为单酰肼、双酰肼或多酰肼化合物，优选双酰 肼化合物，更优选双酰肼化合物中的丁二酸二酰肼、辛二酸二酰肼或ADH。

本发明制备方法中使用的EDCI可以是单碳二亚胺或双碳二亚胺，优选单碳二亚胺，更 优选乙基(N，N—二甲基氨基丙基)碳二亚胺(以下简称EDCI)，在反应中，碳二亚胺的作 用是活化溶液中SH的羧基，使后者在溶液pH大于3的条件下容易与酰肼化合物发生反应。

本发明制备方法中凝胶的灭菌可以采用高压蒸汽灭菌，如121℃加热15～20分钟等，也 可以采用流通蒸汽灭菌，如100℃流通蒸汽加热25～30分钟等。