[发明专利]同型半胱氨酸诊断试剂盒及同型半胱氨酸浓度测定方法

权利要求书

1.一种同型半胱氨酸浓度测定方法，其方法原理如下：

同型半胱氨酸+腺苷基蛋氨酸  同型半胱氨酸甲基转移酶

腺苷基同型半胱氨酸+蛋氨酸

腺苷基同型半胱氨酸+氧+水  氨基酸氧化酶  腺苷基硫代丁酸+氨+过氧化氢

蛋氨酸+氧+水  氨基酸氧化酶  含氧酸+氨+过氧化氢

2过氧化氢+2  10-(羧甲基-氮乙酰基)-3，7-双(二甲胺基)吩噻嗪-→2亚甲基兰

腺苷基硫代丁酸(S-adenosyl-γ-thio-ketobutyrate)

含氧酸(oxo-acid)

将最终反应物亚甲基兰(Methylene blue)置于可见光分析仪或半、全自动生化分析仪下，检测主波长660nm吸光度上升的大小程度，测算出同型半胱氨酸浓度大小测定结果。

2.一种同型半胱氨酸诊断试剂盒，主要成分包括：

缓冲液                    20--500mmol/L

稳定剂                    1--50mmol/L

同型半胱氨酸甲基转移酶    200--500000U/L

氨基酸氧化酶              200--500000U/L

S-腺苷基蛋氨酸            0.1--20mmol/L

10-(羧甲基-氮乙酰基)-3，7-双(二甲胺基)吩噻嗪

                          0.1--20mmol/L

其特征在于：试剂盒可以是干粉状态，在使用前加水溶解后使用；

也可以配制成液体试剂，直接使用。

3.根据权利要求2所述同型半胱氨酸诊断试剂盒，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、S-腺苷基蛋氨酸(S-adenosyl-L-methionine)、同型半胱氨酸甲基转移酶(homocysteine S-methyltransferase EC2.1.1.10)、氨基酸氧化酶(Amino Acid Oxidase EC 1.4.3.2、EC1.4.3.3)、10-(羧甲基-氮乙酰基)-3，7-双(二甲胺基)吩噻嗪组成单剂试剂。

4.根据权利要求2所述同型半胱氨酸诊断试剂盒，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、S-腺苷基蛋氨酸(S-adenosyl-L-methionine)、同型半胱氨酸甲基转移酶(homocysteine S-methyltransferase EC2.1.1.10)、氨基酸氧化酶(Amino Acid Oxidase EC 1.4.3.2、EC1.4.3.3)、10-(羧甲基-氮乙酰基)-3，7-双(二甲胺基)吩噻嗪组成双剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、氨基酸氧化酶、10-(羧甲基-氮乙酰基)-3，7-双(二甲胺基)吩噻嗪组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、同型半胱氨酸甲基转移酶、S-腺苷基蛋氨酸组成。S-腺苷基蛋氨酸、同型半胱氨酸甲基转移酶、氨基酸氧化酶、10-(羧甲基-氮乙酰基)-3，7-双(二甲胺基)吩噻嗪在试剂1或试剂2中的位置可以不限。

5.根据权利要求2所述同型半胱氨酸诊断试剂盒，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、S-腺苷基蛋氨酸(S-adenosyl-L-methionine)、同型半胱氨酸甲基转移酶(homocysteine S-methyltransferase EC2.1.1.10)、氨基酸氧化酶(Amino Acid Oxidase EC 1.4.3.2、EC1.4.3.3)、10-(羧甲基-氮乙酰基)-3，7-双(二甲胺基)吩噻嗪组成多剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、氨基酸氧化酶组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、10-(羧甲基-氮乙酰基)-3，7-双(二甲胺基)吩噻嗪组成；试剂3，由缓冲液、稳定剂、同型半胱氨酸甲基转移酶、S-腺苷基蛋氨酸组成。S-腺苷基蛋氨酸、同型半胱氨酸甲基转移酶、氨基酸氧化酶及10-(羧甲基-氮乙酰基)-3，7-双(二甲胺基)吩噻嗪在试剂1、试剂2或试剂3中的位置可以不限。

6.根据权利要求2所述同型半胱氨酸诊断试剂盒，其特征在于：还包括稳定剂1-4000mmol/L或0.1％-100％体积比。所述稳定剂为：硫酸铵(Ammonia Sulfate)、甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene Glycol)、乙二醇(Ethylene glycol)及防腐剂中的至少一种。