[发明专利]一种DL－酪氨酸－15N的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及稳定同位素标记的的有机化合物的制备方法，尤其涉及¹⁵N标记DL-酪氨酸的合成方法。

背景技术

¹⁵N是氮元素的稳定同位素，¹⁵N标记物可以用作示踪剂，广泛应用于生物化学、医学、药物学、农业科学等领域，尤其对生命科学研究有极为重要的意义。DL-酪氨酸-¹⁵N可以用作示踪剂来研究生物体内新陈代谢，研究药物在体内的代谢中有着不可替代的作用。采用有机合成DL-酪氨酸-¹⁵N，目前国内没有报道。Knoop，F and Oesterlin，H(Z.Physiol.Chem.，1927，170：186)报道了对羟基苯丙酮酸在Pd/C为催化剂，¹⁵N-氨气和氢气的作用下反应制备DL-酪氨酸-¹⁵N。这种方法的原料对羟基苯丙酮酸由于不稳定很难合成，购买价格又过高，不适宜用于生产，不是合适的方法。Boyd，W.J.and Robson，W.(Biochem.J.，1935，29(54)：459)采用对羟基苯甲醛和海因反应后得到的产物经过水解后得到DL-酪氨酸。这种方法需要合成海因-¹⁵N，合成的收率很低，不适合生产。

以上合成方法，没有较为合适的制备DL-酪氨酸-¹⁵N方法，需要探索新的DL-酪氨酸-¹⁵N的合成路线，并对合成工艺进行改进。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的不足之处而提供一种产品收率高、原料利用率高的DL-酪氨酸-¹⁵N的制备方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种DL-酪氨酸-¹⁵N制备方法，其特征在于，以Na¹⁵NO₂为同位素氮源合成DL-酪氨酸-¹⁵N，该方法包括以下步骤：

a.以Na¹⁵NO₂和丙二酸二乙酯为原料，在有效条件下，合成肟基丙二酸二乙酯-¹⁵N；

b.由上述a所得的肟基丙二酸二乙酯-¹⁵N合成乙酰氨基丙二酸二乙酯-¹⁵N；

c.由上述b所得的乙酰氨基丙二酸二乙酯-¹⁵N合成2-乙酰氨基-2-(对甲氧基苄)丙二酸二乙酯-¹⁵N；

d.由上述c所得的2-乙酰氨基-2-(对甲氧基苄)丙二酸二乙酯-¹⁵N，在有效条件下水解，合成DL-酪氨酸-¹⁵N；

e.由上述d所得的DL-酪氨酸-¹⁵N，经过脱色和等电点结晶后得到纯品DL-酪氨酸-¹⁵N。

上述方法具体包括以下步骤：

a.肟基丙二酸二乙酯-¹⁵N的合成：称取一定量的Na¹⁵NO₂、丙二酸二乙酯、甲苯和水，使Na¹⁵NO₂∶丙二酸二乙酯摩尔比为0.1～20∶1，甲苯∶丙二酸二乙酯为体积比0.2～10∶1，水∶Na¹⁵NO₂质量比为0.01～2∶1，加入反应器中并搅拌均匀，将反应体系的温度降至0～10℃，在约1～4小时内滴加入乙酸，乙酸∶Na¹⁵NO₂摩尔比为0.1～15∶1；再将温度升高10～80℃，继续搅拌3～15小时，反应结束后加入甲苯和水，通过萃取分离得到含有肟基丙二酸二乙酯-¹⁵N的甲苯相，经过洗涤干燥和减压蒸馏除去甲苯得到肟基丙二酸二乙酯-¹⁵N；