[发明专利]一种菌种粉的制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及微生物肥料菌种的制造方法，具体来说，本发明涉及一种菌种粉的制备方法。

背景技术：

传统微生物肥料制造方法不足之处是所有菌种发酵液只宜在本厂自产自用，经发酵培养的菌种液体积大，难于包装运输到其他菌肥厂和当地有机肥原料混合加工成颗粒菌肥；而各地菌肥企业要生产此种菌肥，势必都要自行建立菌种厂发酵生产菌种。如此，则需成倍增加各地同类生物肥料厂的设备投资和技术力量，而在企业资金不足和发酵技术人员缺乏的情况下，如无菌种来源势必影响到复合生物肥料的发展和推广应用。

现有技术中也有采用高速离心浓缩方法和板框过滤机脱水浓缩方法对菌种进行浓缩，但是板框过滤机滤孔较菌体大很多，菌体的收集率较低。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种菌种粉的制备方法，所述的复制备方法解决了现有技术中对菌种的芽孢粉收集率较低的技术问题。

本发明提供了一种菌种粉的制备方法，包括一个将菌种培养发酵成芽孢的过程、一个浓缩的过程、一个吸附的过程、一个粉碎和干燥的过程，在所述的将菌种培养发酵成芽孢的过程中，在芽孢率达到80％以上并且占总数目20％的芽孢从孢囊中脱出时停止发酵，其中，在所述的浓缩的过程中，利用直径为12～18cm、长度为90～110cm的4～8万分子量的中空纤维膜将菌种的发酵液循环浓缩到原液体积的10％～15％，在所述的吸附的过程中，利用吸附剂将浓缩后的发酵液吸附成直径小于5～6mm的颗粒，在所述的粉碎和干燥的过程中，利用气流干燥机以120～160℃温度下的热风将吸附处理后的颗粒干燥成含水率小于等于8％、细度小于60目的菌粉。

进一步的，所述的吸附剂采用轻质碳酸钙。

进一步的，所述的菌种是固氮芽孢菌CCTCC M95040。

进一步的，所述的菌种是巨大芽孢杆菌ACCC 10010。

或者，所述的菌种是胶冻样芽孢杆菌ACCC 10013。

进一步的，在吸附的过程中，吸附剂和浓缩后的发酵液的重量百分比为3∶1.5～2.5。

进一步的，在吸附的过程中，吸附剂和浓缩后的发酵液的重量百分比为3∶2。

本发明采用的固氮菌是指固氮芽孢杆菌(Bacillus azotofixans)，因其含有固氮酶，能将空气中的氮转化为氨态氮，简称为“固氮菌”。固氮菌已在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏，编号为CCTCCM95040，公众可按保藏号向该保藏中心购买磷细菌。

本发明采用的磷细菌是指巨大芽孢杆菌(Bacilllus megatherium)ACCC 10010，因其能分解土壤难溶性磷，因此俗称为磷细菌。磷细菌已在中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心(ACCC)保藏，编号为ACCC 10010，公众可按保藏号向该保藏中心购买磷细菌。

本发明采用的钾细菌是胶冻样芽孢杆菌(Bacilllus mucilaginosus)ACCC 10013，此菌因其能分解土壤矿物中钾素能力，因此俗称为钾细菌，钾细菌已在中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心(ACCC)保藏，编号为ACCC 10013，公众可按号索取。

本发明改进了已有菌种的制造方法，将菌种发酵液浓缩干燥成干菌种粉，浓缩成含有高浓度(每克至少含芽孢30亿个)的芽孢菌种粉。浓缩加工制成的芽孢菌种粉可长期贮存备用：(1)供本厂自用作为制造颗粒/粉状菌肥的菌种；(2)经包装运输到各地生物肥料厂加工制造菌肥使用，各地同类企业不需另投资建立菌种厂。

固氮菌的培养发酵可使用公知的培养条件和方法。一般培养时间是20-24小时，培养温度是25-30℃，培养pH是7.0-7.4，通气量0.5-1∶1立方米/1000升，搅拌速度200-300转/分。本菌种优选的培养时间是28小时形成芽孢，培养温度30℃，培养pH7.2，通气量0.5-1∶1立方米/1000升，罐压0.5kg/cm²，搅拌速度200转/分。其优选培养基如下：

筛选及保存菌种用无氮培养基：

淀粉                  0.8％

蛋白胨                0.15％

酵母膏                0.01％

硫酸铵((NH₄)₂SO₄)     0.15％

碳酸钙(CaCO₃)         0.15％