[发明专利]高效液相色谱法测定多利培南含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物分析领域，具体涉及高效液相色谱法测定多利培南含量的方法。

背景技术

随着抗生素在临床上的大量应用，细菌的耐药现象日趋严重。在新抗生素的研发中，近年来国外从典型的β-内酰胺抗生素研究领域正向非典型的β-内酰胺抗生素研究领域转化。碳青酶烯类抗生素就是非典型的β-内酰胺抗生素的一种。

多利培南(doripenem)为日本Shionogi公司开发的碳青酶烯类新广谱抗生素，具有抗菌谱广、对绝大多数β-内酰胺酶稳定的特点。本品已于2005年9月在日本上市，具有良好的临床应用价值和市场前景。

EP1270575A1中公开的多利培南的含量测定方法是采用高效液相色谱仪、紫外检测器和十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，色谱条件为以对乙酰氨基酚为内标物质，0.002mol/L的磷酸盐溶液(pH5.8)∶乙腈＝191∶9为流动相，检测波长为240nm。比较多利培南与内标物质的色谱峰面积，并用多利培南标准品以外标法定量。该方法存在以下不足之处：①对缓冲液pH要求苛刻，只能在pH5.8时正常测定，pH稍有变动，峰形就会分叉，不能正常测定。②使用240nm作为检测波长，非多利培南的最大吸收波长，方法灵敏度较低，最小检测限为3ng。③使用内标物质，配置样品、结果计算都比较麻烦。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中多利培南的含量测定方法对缓冲液pH要求苛刻、灵敏度较低及不够方便等缺点。

本发明所要解决的技术问题是提供一种高效液相色谱法测定多利培南含量的方法，采用紫外检测器进行测定，其特征在于，该方法采用的色谱柱为辛烷基硅烷键合硅胶色谱柱(反相色谱柱)，流动相为磷酸的钠盐水溶液和乙腈，且磷酸的钠盐水溶液的pH为5.0～6.0。

所述的磷酸的钠盐水溶液为NaH₂PO₄、Na₂HPO₄或Na₃PO₄的水溶液，优选NaH₂PO₄水溶液。

所述的磷酸的钠盐水溶液与乙腈的体积比为100∶10～100∶1，优选100∶4。

所述的磷酸的钠盐水溶液浓度为0.01～0.2mol/L，优选0.02mol/L。

所述的磷酸的钠盐水溶液的pH优选为5.7。

所述的磷酸的钠盐水溶液的pH值优选用NaOH或磷酸来调节。

所述的紫外检测器的检测波长优选为292nm。

以下提供本发明含量测定方法的实验部分，以证明本发明方法的优越性：

1.流动相的选择

1.1选取辛烷基硅烷键合硅胶色谱柱(5μm，Φ4.6×150mm)