[发明专利]富硒复合益生菌活菌的固体培养方法

说明书

本发明属于有治疗作用、可常温保存的富硒复合益生菌制品的固体培养方法。

目前，双歧杆菌、嗜酸乳杆菌等益生菌制品对人体所具有保健作用已普遍为人所共知，但对人体保健和治疗作用仅显效于肠道或消化系统，二是难于常温保存，三是本人发明的专利申请号为2005100060658的“富硒复合益生菌活菌制剂保健品的制备方法”，基本上属于液体发酵法存在能耗大、成本高，最终制品的活菌量相对较少的缺点。

本发明目的是通过富硒培育，强化益生菌对人体的保健和治疗作用，并使其能在常温中保存的同时，在整个发酵过程中，采用固体培养为主，从而使产品生产减少能耗，降低成本，提高单位活菌数量。

本发明技术方案：一、嗜酸的乳杆菌富硒固体培养，将嗜酸乳杆菌的培养物加入亚硒酸钠0.5ug/g-5ug/g，搅拌均匀，在一定压力下灭菌2小时，冷却至40℃-50℃、无菌下接种量为5％-20％的液体嗜酸乳杆菌液体菌种，置于经灭菌的无毒塑料袋中，然后抽真空后，再向该塑袋回充无菌无氧的N₂，于30℃-37℃下厌氧培养1-3d，待活菌达到一定数量时，终止培养，用45℃热风干燥至含水量为8％，粉碎过筛备用。二、双歧杆菌、粪肠球菌等其它复合益生菌的固体培养：将双歧杆菌等复合益生菌的培养物，在一定压力下，灭菌2小时，冷却至40℃-43℃立即接种5％-20％的双歧杆菌等复合益生菌的液体菌种，置于无毒无菌的塑料袋中，然后抽真空，再回充N₂，于36℃-40℃下厌氧培养1-3d，待活菌数达到一定量时，在真空或冷冻真空干燥，使含水量至8％-9％，粉碎过筛备用。三、取适量的多孔淀粉与富硒嗜酸乳杆菌活菌粉和双歧杆菌、粪肠球菌等复合益生菌活菌粉混合均匀，充分吸附即可与合适的壁材制成具有治疗作用，并可常温保存的富硒复合益生菌活菌制品。

本发明与现有技术相比，有显著优点：1、将有毒的无机硒通过生物转化为无毒易吸收的有机硒，具有成本低、效率高、保健效果好等优点。2、采用多孔淀粉作为活菌的芯材，具有孔径大、包结充分、吸附完全、成本低、可常温保存、适应批量生产和销售、贮运。3、固体培养法比液体培养具有能耗少、成本低、单位活菌数量高等优点。

实施例：取1000克嗜酸乳杆菌的固体培养物加入含亚硒酸钠3毫克的溶液50毫升，搅拌均匀后，于0.1Mpa下灭菌2小时，冷却至45℃接种10％的嗜酸乳杆菌液体菌种，然后将培养物放入无菌密闭的塑料袋中，抽真空后，再回充N₂，于35℃左右，厌氧培养发酵1-3d，待活菌数大于1×10⁹CFU/g时，终止培养，然后45℃热风干燥，粉碎、过筛，即制得富硒嗜酸乳杆菌活菌干粉备用。另取1000克双歧杆菌等益生菌的固体培养物，采用相同的方法，灭菌、降温至42℃左右，接种10％的双歧杆菌等益生菌的液体菌种，放入密闭塑袋中，抽真空，后回充N₂，于37℃左右厌氧培养1-3d，待活菌数达到1×10⁹CFU/g时，终止培养。所不同的是在具培养物中不加亚硒酸钠，另外干燥采用真空冷冻干燥，制成双歧杆菌复合益生菌活菌冻干粉备用，然后称取多孔淀粉1200克与富硒嗜酸乳杆菌粉和双歧杆菌复合益生菌冻干粉混合，搅拌均匀，并配合适当的壁材，即可制得具有治疗保健作用的富硒复合益生菌制品。