[发明专利]一种蛋白质－核酸嵌合体及其制造方法和应用

说明书

1、技术领域：

本发明是一种蛋白质-核酸嵌合体及其制造方法和应用，属于蛋白质-核酸嵌合体及其制造方法和应用的创新技术。

2、背景技术：

蛋白质是生物体的重要功能分子。它们决定了细胞的形态，结构和各种功能。因此虽然蛋白质由基因编码，但生物体的正常功能最终涉及到各种蛋白质之间的协调。研究蛋白质的表达，调控；不同的蛋白间的作用，及大量的不同的蛋白质组之间的作用就具有重大意义。蛋白质组学的研究有助于对生命的认识，及提供各类生物学的信息，用于诊断及医药开发。

目前为止，基因组学的研究已产生大量的基因序列。可是，目前对这些基因序列的生物学意义的理解相对于数据而言，是很少的。而且基因组学的研究成果是不能直接转化为蛋白质学的数据，因为理论上只有60％的基因组学数据与蛋白质学的相符。因此有必要发明新的方法学用于蛋白质组学方面的研究及在医学方面的应用。

目前已有若干蛋白质芯片的发明，全部应用各种不相同的点焊技术。如非特异的表面吸附；表面化学涂层，用共价联接；这二种方法的主要缺点是蛋白质只能随机地，多位点的和表面结合。结果是功能位点被覆没。第三种方法是亲和表面涂层。用Ni²⁺或avidin。而且这几种方法都不能区别蛋白质的复合成分。并且这几种方法都不成熟，且不易改进。主要问题是蛋白点焊技术尚不过关，且是否能过关值得怀疑。其原因在于各种蛋白结合到芯片上的能力各不相同，且大多蛋白易于降解；第二大问题是蛋白需在温性环境下结合到芯片上，极不易运输及保存。

3、发明内容：

本发明的目的在于考虑上述问题而提供一种用途广泛的蛋白质-核酸嵌合体。

本发明的另一目的在于提供一种简单方便的蛋白质-核酸嵌合体及其制造方法。

本发明的另一目在于提供将蛋白质-核酸嵌合体制造方法应用于制造各种密度蛋白质芯片，或运用于制造可定向位置，基于DNA芯片或纳米芯片的蛋白质，抗体芯片，还可用于制造有特异性细胞导向的antisense或siRNA药物。

本发明蛋白质-核酸嵌合体，由蛋白部分(P)和核酸部分(N)及联结俩者之间的蛋白质结合底物(S_E)组成一个P-N-Block。

上述蛋白部分(P)含有兴趣蛋白(Pi)，结合蛋白质(P_E)，和多肽标记(Pt)。

上述核酸部分(N)含有DNA或带标记物的DNA(No)及连锁物(N_L)。

本发明蛋白质-核酸嵌合体的制造方法，其特征在于包括有如下步骤：

1)把兴趣蛋白(Pi)与结合蛋白质(P_E)及多肽标记(Pt)通过分子生物学的方法嵌合形成蛋白部分；

2)通过化学合成的方法把可分解或不可分解的连锁物(N_L)与带或不带标记的Oligonucleotide联接形成核酸部分；

3)通过生物化学的方法把蛋白质结合底物(S_E)与核酸部分相联；

4)通过生物化学方法把蛋白部分与核酸部分相联。

上述兴趣蛋白(Pi)指生物界中所有的种类的蛋白质，结合蛋白质(P_E)指生物界中所有种类的具有不可逆抑制底物的酶，或其它与蛋白质结合底物共价相联的蛋白质，多肽标记(Pt)指生物界中所有的种类的可用于标记的多肽。

上述核酸是DNA或带标记物的DNA(No)指化学合成的Oligo和单，双链DNA片断。

上述核酸指可转录为生物界中所有种类的蛋白质的基因序列，每一个核酸带有各自的特异的基因序列。

上述连锁物(N_L)指带有特异化学基团并合成到核酸上的分子。

上述制造蛋白质-核酸嵌合体多聚体的方法运用于制造各种密度蛋白质芯片，或运用于制造可定向位置，基于DNA芯片或纳米芯片的蛋白质，抗体芯片，还可用于制造有特异性细胞导向的antisense或siRNA药物。

上述各种密度蛋白质芯片指结合到载体上的带标记的一个P-N-Block至多个P-N-Block形成的蛋白质芯片。

上述可定向位置，基于DNA芯片或纳米芯片的蛋白质，抗体芯片指各个P-N-Block各自带有特异的基因序列，可被DNA芯片或纳米芯片上的互补的基因序列所识别。

上述蛋白质-核酸嵌合体多聚体可用于核酸药物的传输。

上述制造蛋白质-核酸嵌合体方法还应用在提供监测蛋白质间相互作用的如下方法：

1)提供各自带有特异的基因序列的P-N-Block