[发明专利]一种丹酚酸B化学对照品的分离制备方法

权利要求书

1.一种丹酚酸B化学对照品的分离制备方法，其特征在于：以重量含量10～97％的丹酚酸B提取物为原料，以制备型高效液相色谱为分离手段，以甲醇-酸水溶液为洗脱体系，具体步骤为，

(1)样品预处理：将重量含量10～97％的丹酚酸B提取物用甲醇、乙醇、水或50％甲醇溶液溶解，配置成重量浓度为8～60mg/ml的丹酚酸B提取物溶液，经0.22～0.45μm微孔滤膜过滤；

(2)色谱柱处理：高效液相色谱柱选择制备型高效液相色谱柱，以5-20倍柱体积的洗脱体系溶液平衡色谱柱；洗脱体系溶液为甲醇-酸水溶液，其中甲醇于甲醇-酸水溶液中的体积浓度为50～80％；酸于酸水溶液的体积浓度为0.1～1％；

(3)进样：将过滤后的样品溶液进样，进样体积为1～100ml；

(4)洗脱：采用洗脱体系溶液洗脱色谱柱，流速控制在10～600ml/min，在线紫外监测，收集含有丹酚酸B的洗脱液；

(5)丹酚酸B化学对照品的获取：减压浓缩所收集到的丹酚酸B洗脱液至无甲醇，冷冻干燥。

2.根据权利要求1所述丹酚酸B化学对照品的分离制备方法，其特征在于：所述制备型高效液相柱可以选用商品化或自己装填的制备型高效液相柱；其填料可为C8或C18键合相填料。

3.根据权利要求2所述丹酚酸B化学对照品的分离制备方法，其特征在于：所述自己装填的制备型高效液相柱装填方式为湿法装柱。

4.根据权利要求3所述丹酚酸B化学对照品的分离制备方法，其特征在于：所述制备型高效液相柱的柱效在2000以上。

5.根据权利要求2所述丹酚酸B化学对照品的分离制备方法，其特征在于：所述制备型高效液相柱的填料粒径为5～20μm。

6.根据权利要求1所述丹酚酸B化学对照品的分离制备方法，其特征在于：所述洗脱体系中的酸可为甲酸或乙酸。

7.根据权利要求1所述丹酚酸B化学对照品的分离制备方法，其特征在于：所述在线紫外监测，其监测波长为254nm～290nm。

8.根据权利要求1所述丹酚酸B化学对照品的分离制备方法，其特征在于：所述丹酚酸B洗脱液收集后，减压浓缩，浓缩温度控制在55～65℃。