[发明专利]一种来自西太平洋热液区菌Sulfobacillus acidophilus

说明书

技术领域：

本发明涉及一种高温菌，来自西太平洋热液区Sulfobacillus acidophilus。

背景技术

据估计地球上约有3000多万种物种，目前已知仅有150万种。而海洋占地球面积的七成，总水量的97％，它拥有地球上物种的80％以上。许多海洋微生物常处于高压、高盐、高温或低温环境等特别环境，具有不同大陆上微生物的特性，由于繁多类型的海洋微生物所处独特的生态环境，造就了适应特殊环境的特殊基因或基因组，有着各种各样的功能基因。

生物冶金技术，又称生物浸出技术，通常指矿石的细菌氧化或生物氧化，由自然界存在的微生物进行。这些微生物被称作适温细菌，大约有0.5-2.0微米长、0.5微米宽，只能在显微镜下看到，靠无机物生存，对生命无害。这些细菌靠黄铁矿、砷黄铁矿和其他金属硫化物如黄铜矿和铜铀云母为生。适温细菌和其他细菌通常生活在因硫氧化而产生的酸性环境中，如温泉、火山附近地区和富含硫的地区。由澳大利亚一家公司培养的适温细菌最早是在西澳的一矿山中发现的，在含硫的酸性环境中，在高温条件下对可溶性金属有很好的聚积作用。

适温细菌和其他“靠吃矿石为生”的细菌如何氧化酸性金属的机理不得而知。化学和生物作用将酸性金属氧化变成可溶性的硫酸盐，不可溶解的贵金属留在残留物中，铁、砷和其他贱金属，如铜、镍和锌进入溶液。溶液可与残留物分离，在溶液中和之前，采取传统的加工方式，如溶剂萃取，来回收贱金属，如铜。残留物中可能存在的资金属，经细菌氧化后，通过氰化物提取。

发明内容：

本发明从西太平洋热液区获取的，细菌名：(拉丁语名：Sulfobacillusacidophilus)

其主要表型特征：

革兰氏阳性、杆状、能够自养、异养、混和营养型、耐高温(最高能够耐受到70℃)、嗜酸、高活动性、具有浸矿能力。

与Acidithiobacillus ferrooxidans相比长处是耐受的温度更高。

与Leptospirillus ferrooxidans相比长处是耐受温度高，同时能够异养和自养两种营养型。同时能够利用硫为能量来源。能够利用硫化矿物浸矿。

大小：长杆状(0.3-0.8×1-4um)

附图说明：

图1此菌电镜照片。

图2为生长曲线。

图3为浸矿活性。

具体实施方式：

培养基成分：

使用H₂SO₄.调节pH为2。

异养：添加酵母提取物：终浓度：0.25g/l.Fe含量：10.0mg/l of FeSO₄x7H₂O

自养：Fe含量：13.9g/l of FeSO₄x7H₂O(用H₂SO₄调节其pH＝1.7)

固体培养基为液体培养基中加入1％的琼脂。

以上培养基使用前均需要高温蒸汽121℃灭菌15-20分钟。

分离及筛选：

取热液区样品涂布平板，于45℃培养，得到单菌落，然后挑单菌落再次于新平板上划线培养，得到单菌落，再划线，直到得到纯培养的菌株。

鉴定：通过该菌株的表型特征以及其16SrDNA序列鉴定。

16SrDNA序列测序的方法：

16SrDNA序列：

提交号bANkit851655，登陆号EF088287。

在Genbank中比对结果与标准株Sulfobacillus acidophilus DSM 10332株(登陆号AB089842)以及NAL株(登陆号AF050169)的同源性均为99％。

(一).提取基因组DNA：将初步鉴定为不同种的菌株提取Genomic DNA，方法如下：

1.取对数期(否则不易裂解)细菌1.5-4.5ml，12000rpm，1min

2.用567uL的TE(pH8.0)重悬，加入3uL RNA酶(20ug/uL)，1uL溶菌酶(50mg/ml)，混匀，37℃ 10min以上(此时菌液可能变澄清)；再加入30uL 10％的SDS(十二烷基磺酸钠)和3uL 20mg/mL的蛋白酶K，混匀，55℃ 15min以上(此时菌液应为澄清，否则菌不是处于对数期或是菌数太多而没有完全裂解)