[发明专利]一种可原位同时检测多种常见小分子药物的酶标芯片法

权利要求书

1.一种在96孔酶标板孔底粘贴点样后薄膜进行检测生物分子的新型装置。特征为采用三维高分子多聚物薄膜或无机聚合物膜，将生物探针分子用机械手按照设计点阵进行点样，经切割后粘贴于酶标板孔底，用抗体、配体、配对核酸等进行特异识别，然后用原位显色方法结合图像采集设备判定被测物的浓度。

2.根据权利要求1所述的薄膜包括聚丙烯酰胺凝胶、聚偏二氟乙烯膜(PVDF膜)、硝酸纤维素膜(NC膜)、聚四氟乙烯、聚苯乙烯塑料、纳米陶瓷、琼脂糖凝胶等。

3.根据权利要求1所述的点样采用机械手进行，样品点直径可以介于75微米到300微米之间，每个酶标孔可以容纳的样品点为1-81个。

4.根据权利要求1所述的薄膜经过点样后进行机械切割，制得与酶标孔直径吻合的均匀的圆形芯片，使用粘贴方式将圆形芯片粘贴于酶标板底部，制成酶标芯片。

5.根据权利要求1所述的检测方法为原位显色。加入被检测样本，然后通过特异抗小分子药物抗体和辣根过氧化物酶(HRP)等的标记二抗或者是标记核酸，利用直接法或竞争抑制法进行检测。采用可以原位呈色反应的底物，如二胺基联苯胺(DAB)等，使阳性点出现有颜色的斑点(直接法)或使阳性点出现无颜色的斑点(竞争抑制法)。

6.根据权利要求1所述的图像采集设备包括数码相机、CCD等，根据灰度值和配套软件，判定检测样品中含有代测生物分子的浓度。

7.根据权利要求1所述的方法采用通用的96孔酶标板，因此在加样和操作上易于被人接受并广泛推广应用。同时又增加了生物芯片高通量的优势，通过机械手在一个孔中同时点多个样品点，同时检测多种代测物质，使得酶标板的检测通量大大提高。

8.根据权利要求1所述的方法可以适合多种检测领域，如常见毒品、自身免疫原、肿瘤标志物、细胞因子系列的检测等。