[发明专利]微生物药敏检测板干燥工艺

说明书

技术领域：

本发明涉及微生物技术领域。具体涉及微生物药敏检测板干燥工艺。

背景技术：

近年来细菌耐药性的产生及耐药菌株引起的感染问题日趋严重，医院感染目前已成为全球性的突出问题。目前，为适应临床实验室对微生物鉴定药敏设备的专业需求，市场对微生物系统产品的功能提出了更高的要求，开发操作简便、鉴定范围广、药敏MIC值准确实用、并可以快速给出实验结果的微生物产品已成为一种迫切要求。

目前国内已有的微生物检验产品很多，但存在一定的局限性，例如现在产品的药敏板条种类较少，不能满足各种类型细菌的药敏试验，另外板条中抗生素的浓度梯度较少，大部分只可报告定性的敏感、中度敏感和耐药结果，而不能准确的报告出定量的MIC值。

鉴于此，本发明人参照国际NCCLS标准体系，结合国内临床具体用药和流行病学情况，自行研究开发了用于微生物药敏试验的药敏检测板，该药敏板条具有6-12个浓度梯度，可报告定量的MIC值，克服目前国内微生物产品的不足，提高了药敏检测的准确性。该微生物药敏检测板生产工艺流程如下：

(1)配置抗生素稀释液

蒸馏水中加入迷迭香抗氧化剂配置成水溶液作为抗生素的稀释液待用；

(2)分装

将配置好的稀释液分装为每试管15ml待用；

(3)配置原液

根据稀释要求配置各种抗生素的初始原液；

(4)分装液料

根据各种板条浓度稀释要求，将步骤(3)的抗生素原液加入到相应的分装好的步骤(2)试管中。

(5)加样分装板条

使用分装系统在96孔的相应位置对指定的药敏板条加样，每孔加50ul；

(6)板条干燥；

(7)包装。

目前，抗生素的干燥方法通常采用的是真空冷冻干燥法。真空冷冻干燥技术在生物工程、医药工业、食品工业、材料科学和农副产品深加工等领域有着广泛的应用。所谓真空冷冻干燥是指：制品完全冻结，并在一定的真空条件下使冰晶升华，从而达到低温脱水的目的，此过程即称为冷冻干燥，简称冻干。冻干的固体物质由于微小的冰晶体的升华而呈现多孔结构，并保持原先冻结时的体积，加水后极易溶解而复原，制品在升华过程中温度保持在较低温度状态下(一般低于-40℃)。干燥的结果能排出95～99％以上的水份，有利于制品的长期保存。制品干燥过程是在真空条件下进行的，故不易氧化。针对部分生化药物的化学、物理、生物的不稳定性，冻干已被实践证明是一种非常有效的手段。

由于真空冷冻干燥过程中出现升华现象，抗生素水溶液由固体直接变成气体，抗生素粉未会随升华过程而附于各孔的孔壁上，而不是完全留在底部，并且由于升华过程中，抗生素是直接析出，形成的抗生素颗粒会非常小，这些小颗粒不易附着在各孔孔壁上，会随着运输过程而脱离，这样会使某些孔中抗生素浓度降低，从而降低某些孔中的抗生素的抑菌程度，造成MIC检测结果可能出现跳孔现象，而无法判断出准确的MIC值，影响检测药敏板条的质量。上述药敏板条生产工艺中也是采用真空冷冻干燥法，因而该干燥工艺在一定程度上影响了药敏板条的质量。

发明内容：

本发明要解决的技术问题在于克服上述不足之处，研究设计一种防止抗生素干燥过程损失的新工艺。

本发明提供了一种微生物药敏检测板干燥工艺。

本发明采用了一种新的干燥方法一“常温干燥法”。此种方法控制室温在20-25℃之间，湿度在30％-40％之间即可进行干燥，因此该方法大大降低了成本。且在常温干燥过程中温度较高，在零度以上，抗生素水溶液是由液体变成气体的过程，不会出现升华现象，排出水分后抗生素完全留在底部，进行检测时抗生素会充分溶解，保证了MIC值的准确性，提高了药敏板条的质量。

本发明生产工艺确定的研发过程：

一、干燥方法的确定

1、本发明人所采用的常温干燥法主要的工艺条件为：

A、干燥设备：风干机或吹风机

B、干燥环境：将温度控制在20-25℃之间，湿度控制在30％-40％之间。

2、为了确定常温干燥法的干燥时间以及不同干燥时间对板条质量的影响，进行了如下的实验：

(1)干燥效果实验：

A、随机抽取几块微孔板，在加样之前对板条称重，并记录其称重结果

B、将抗生素水溶液加入微孔板中，加样完毕再进行称重，记录结果。

C、将板条放入燥间中进行干燥，使其温度控制在20-25℃之间，湿度控制在30％-40％之间。

D、每2小时测定干燥室内的温度和湿度，确保达到干燥要求。