[发明专利]低分子姬松茸多糖及制备方法和在抗肿瘤转移药中的应用无效
申请号: | 200610151128.3 | 申请日: | 2006-12-06 |
公开(公告)号: | CN101067006A | 公开(公告)日: | 2007-11-07 |
发明(设计)人: | 刘吉成;牛英才 | 申请(专利权)人: | 齐齐哈尔医学院 |
主分类号: | C08B37/02 | 分类号: | C08B37/02;A61K31/716;A61K36/06;A61P35/00 |
代理公司: | 齐齐哈尔鹤城专利事务所 | 代理人: | 叶仲刚 |
地址: | 161042黑龙江省*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分子 姬松茸 多糖 制备 方法 肿瘤 转移 中的 应用 | ||
1、一种低分子姬松茸多糖,是从食用真菌姬松茸子实体中提取纯化的,主体是由葡萄糖组成的β-(1→3)键联接的均一葡聚糖,分子量约为48000。
2、一种如权利要求1述的低分子姬松茸多糖的制备方法,将姬松茸子实体粉碎,蒸馏水浸提,加入乙醇沉淀得姬松茸粗多糖,将姬松茸粗多糖用中性蛋白酶与Sevag法联合脱蛋白,并以DEAE650M纤维素柱层析,用0.1M的NaCl溶液进行梯度洗脱,洗脱液用Toyopearl HW-65F柱层析,用0.2M的NaCl溶液洗脱,洗脱物用Toyopearl HW-50S柱层析,并用0.2M的NaCl溶液洗脱,干燥即得低分子姬松茸多糖。
3、根据权利要求2所述的低分子姬松茸多糖的制备方法,其制备具体包括以下步骤:
步骤一:将姬松茸进行粉碎;步骤二:取过40目筛姬松茸粉,加入10~30倍量的蒸馏水,100℃浸提2~4h;步骤三:提取液经高速离心机离心后,将残渣再加入10~30倍量的蒸馏水,加热至45℃~55℃加入按原料干重计算的复合酶:木瓜蛋白酶1.0~2.0%,纤维素酶0.5~1.0%,果胶酶1.0~2.0%,PH4.5~5.0,酶解1~2h后升温之100℃,在100℃保持2~4h,经高速离心去渣;将2次提取液合并;步骤四:将合并液真空浓缩至原体积的1/2~1/4左右,再加入2~5倍量的90%~100%乙醇,沉淀12~24h,将沉淀物与乙醇溶液分离即得姬松茸粗多糖;步骤五:将姬松茸粗多糖用1~2%中性蛋白酶与Sevag法联合脱蛋白,交替进行2次,离心;步骤六:取去沉淀的多糖溶液,经DEAE650M纤维素柱层析,柱上层析物用0.1M的NaCl溶液进行梯度洗脱;步骤七:洗脱液用ToyopearlHW-65F柱层析,柱上层析物用0.2M的NaCl溶液洗脱:步骤八:0.2M的NaCl溶液洗脱物,用Toyopearl HW-50S柱层析,并用0.2M的NaCl溶液洗脱即得低分子姬松茸多糖。
4.权利要求1所述的低分子姬松茸多糖在制备抗肿瘤转移的药物中的应用。
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