[发明专利]一种新型检测评估危重病人的试剂盒和方法

权利要求书

1.本发明涉及一种检测、评估危重病人的试剂盒和新方法，其特征是采用质谱法对样品中已被基质捕获的变异的β2-微球蛋白生物标志进行精确地鉴别、检测的方法。该方法通过以下步骤实现：

(1)样品处理及质谱标准化质控血清制备；

(2)样品上样至磁珠基质上；

(3)洗涤；

(4)质谱的定量控制及质谱测试；

其中所述步骤(1)将生物样品稀释在稀释缓冲溶液中。用O型血，男女相等，混合制备质谱的标准化质控血清；所述步骤(2)将质谱的标准化质控血清及样品点样在磁珠基质上。所述步骤(3)用结合缓冲液洗涤。在样品完全干燥前将第一份洗涤溶液加到该位点。洗涤溶液在位点上至少停留10秒。彻底清除第一份洗涤溶液，用第二份洗涤液重复以上步骤。用0.5～2％三氟乙酸彻底洗涤磁珠，将生物标志洗脱至质谱专用的金属片上，自然干燥金属片，加0.5μL以50％乙腈，0.5％三氟乙酸制备的吸能分子标准溶液。吸能分子可用Sinapinic acid或alpha-Cyano-4-hydroxycinnamic acid等；所述步骤(4)用激光解吸/离子化飞行时间质谱仪，用氮激光仪(337nm)和80cm或120cm飞行管分析阵列去分析变异的β2-微球蛋白生物标志。用计算机分析数据为11465±15及11648±15Da峰值。定量性质谱调控：每次测试前，用质谱的标准化质控血清，将标准化质控血清中用于定量的标准峰4091.1Da或6634.0Da强度调至50％信号强度的最大值。

2.权利要求1所述的β2-微球蛋白生物标志试剂盒和分析方法，所捕获的变异的β2-微球蛋白生物标志来源于已经脱离人体的全血、血清和血浆。

3.权利要求1所述的基质包含阴离子表面基质、阳离子表面基质、抗β2-微球蛋白抗体基质。基质的支持物包含陶瓷珠、磁性珠、多聚体或Sepharose beads。