[发明专利]鉴定小麦高分子量谷蛋白亚基的生物质谱方法

权利要求书

1.一种鉴定小麦高分子量谷蛋白亚基的生物质谱方法，包括如下步骤：

(1)在制备小麦高分子量谷蛋白亚基的生物质谱分析样品时，先用35-45％的丙酮沉淀蛋白提取液2-4小时，离心后取沉淀，即为高分子量谷蛋白亚基；

(2)在获得高分子量谷蛋白亚基沉淀后，用溶解液溶解高分子量谷蛋白亚基，溶解液的配比为：以溶解液体积为计量基准，溶解液中乙腈溶液的体积为溶解液体积的25-35％，TFA所占的体积为溶解液体积的0.4％，其余为高纯水，用溶解液溶解高分子量谷蛋白亚基的溶解时间为1小时；

(3)利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定小麦高分子量谷蛋白亚基时，基质选用芥子酸SA即3，5-Dimethexycinnamic acid，3，5-二甲氧基-4-羟基肉桂酸，用10mg基质溶于1ml50％乙腈+0.05％TFA中，标样选用Albumin，66431.08Da，0.1％TFA溶解，分子量的测定采用线性模式，分子量范围10000-100000，点样采用混合上样法，基质1μl，样品0.1μl。

2.如权利要求1所述的鉴定小麦高分子量谷蛋白亚基的生物质谱方法，其特征在于在制备高分子量谷蛋白亚基的质谱样品时，先用40％的丙酮沉淀蛋白提取液，沉淀3小时后，离心后的沉淀为高分子量谷蛋白亚基。

3.如权利要求1所述的鉴定小麦高分子量谷蛋白亚基的生物质谱方法，其特征在于用溶解液溶解高分子量谷蛋白亚基，溶解液的最优配比为：以溶解液体积为计量基准，溶解液中乙腈溶液的体积为溶解液体积的30％，TFA所占的体积为溶解液体积的0.4％，其余为高纯水，溶解时间为1小时。