[发明专利]一种牡丹叶总黄酮提取物及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明属于中药新药研发领域。涉及一种从牡丹药材中新的药用部位--叶子中分离得到的有效部位，并提供其制备方法和医药用途。

背景技术

牡丹不仅是观赏性植物，其还可以作为药用。2005年版的《中华人民共和国药典》收载的牡丹皮(亦称丹皮)作为法定的中药材使用，为毛茛科植物牡丹Paeonia suffruticosa Andr.的干燥根皮，具有解热、镇痛、抑菌、降压等作用。牡丹皮作为牡丹的药用部位，采收周期较长(3年)，同时取其根部，植株无法存活，因此从合理利用中药材资源的角度出发，可考虑开发该药材的其它部位作为新的药用部位使用，例如有人研究牡丹叶的50％煎剂，可用于治疗痢疾；牡丹的花可提取芳香油，也可食用等。但是这些研究都不够深入，对这些部位的化学成分及其药理活性的研究还很少。因此有必要对其进行深入研究，明确其化学成分，提取其有效部位，发现新的医药用途，合理开发利用牡丹资源。

发明内容

本发明要解决的技术问题之一是提供一种牡丹叶总黄酮提取物，其中的活性成分是来自于牡丹的叶子中提物得到的有效部位--牡丹叶总黄酮。

本发明要解决的另一个技术问题是提供用于抗炎的牡丹叶总黄酮提取物的制备方法。

本发明进一步提供了以上述牡丹叶总黄酮为主要活性成分用于抗炎的纯中药药物制剂和相应的药物剂型。

为解决上述技术问题，本发明研究制定了如下技术方案。

本发明所用的牡丹叶为毛茛科植物牡丹Paeonia suffruticosa Andr.的干燥叶。本发明人经过多年的研究，用牡丹叶为原料，经过溶剂提取、大孔树脂吸附、溶剂洗脱、洗脱液浓缩干燥，得到牡丹叶提取物，提取物中含牡丹叶总黄酮含量以芹菜素计为50％～95％以上。牡丹叶总黄酮提取物植物化学成分的研究结果表明，其中主要含有芹菜素、木樨草素、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、木樨草素-7-O-葡萄糖苷等化合物。

本发明比较优选的实施方案，牡丹叶总黄酮是通过下述方法制备得到的：

(1)提取：以牡丹叶为原料，用水或含水的乙醇提取；

(2)浓缩：浓缩提取液，至相对密度为1.20的浸膏，加水使浸膏溶解，离心，得上清液；

(3)除杂：上清液通过大孔吸附树脂柱，依次用水、含水乙醇洗脱除杂；

(4)解析：再以乙醇或含水乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液浓缩干燥，得牡丹叶总黄酮提取物。

本发明所述的制备方法中提取过程中选用的乙醇浓度为X，0＜X≤95％，优选为50％≤X≤95％；提取方法可以是渗漉提取或回流提取，乙醇与原料之间应保持比较大的比例，以保证提取完全，可以使用8～16倍药材重量的溶剂提取2～3次。

所述的吸附树脂可以为苯乙烯、二乙烯苯、丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯中的任意一种或几种为骨架材料的树脂，具体可包括ZTC-1、D101、AB-8或DM301型树脂。优选为ZTC-1树脂。

所述除杂过程中先用4～10倍于树脂体积(V/W)的水，再用2～5倍树脂体积(V/W)的含水乙醇，乙醇浓度为X，10％≤X≤30％，洗去柱内未被吸附的杂质，使用该方法能够有效去除杂质。

所述解析过程中所用的乙醇的浓度为X，40％≤X≤95％；优选为40％≤X≤70％。并确定以4～12倍于树脂体积(V/W)的含水乙醇洗脱，洗脱液浓缩干燥，得牡丹叶总黄酮提取物。

在除杂及解吸过程中，可通过随时检测洗脱液中牡丹叶总黄酮的含量来监控除杂或解析乙醇的用量，控制除杂或解析的时间。牡丹叶总黄酮的含量测定方法可通过本领域内公知的方法进行测定，本发明在此提供一套可行的高效液相色谱测定方法。具体如下：

1.对照品溶液的制备

称取芹菜素对照品约3mg，精密称定，置于25mL量瓶中，加适量甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

2.供试品溶液的制备

取牡丹叶总黄酮制备过程中的各段洗脱物约1g，精密称定，置于100mL圆底烧瓶中，加80乙醇60mL，加热回流约1小时，滤过，残渣重复操作两次，合并滤液，蒸干，残渣用水定量转移至25mL量瓶中，再加水稀释至刻度，超声并振摇使均匀后，立即精密吸取3mL上已经预处理的D-101大孔吸附树脂柱(0.8×30cm，装20cm，用150mL水洗至无醇)，过柱反复吸附5次后，用50mL 10％乙醇洗脱，再用80％乙醇50mL洗脱，收集80％乙醇洗脱液，蒸干，残渣用甲醇定量转移至10mL量瓶中，即得供试品溶液。

3.测定法