[发明专利]一种治疗用A型肉毒毒素冻干粉针剂新型冻干保护剂配方

说明书

技术领域

本发明涉及A型肉毒毒素的药物制剂，在加入优选的一种冻干保护剂以冻干粉针剂的固体形式在室温下可稳定贮藏至少12个月，在4℃可稳定储存36个月。

背景技术：

肉毒神经毒素(botulinum neurotoxin，BoNT)，也称肉毒毒素(botulinumtoxin)，是肉毒梭菌在厌氧条件下分泌的多肽神经毒素。神经毒素通过抑制神经肌肉接合处的神经递质乙酰胆碱的释放，影响神经冲动的传递，导致肌肉松弛性麻痹。

A型BoNT是目前已知的最剧毒物质之一，但是近年来，已经将其应用于对斜视、眼睑痉挛、面肌痉挛及痉挛性斜视等疾病进行治疗，并取得满意疗效。1989年A型BoNT被美国食品和药品管理局(FDA)批准用于12岁以上12岁以上的由肌肉张力障碍引起的斜视、眼睑痉挛等疾病(http://www.garlandscience.com/cbl/pdflibrary/botox_timeline.pdf)。这是世界上第1个被批准为治疗药物的微生物毒素。

在自然状态下或人工培养基上A型BoNT通常以一种复合体形式存在，即神经毒素和血凝素或非血凝活性蛋白的复合体。象许多生物活性蛋白一样，BoNT的生物活性与它的空间形态结构有关，血凝素在保持BoNT三维结构及稳定性起着重要作用(Sugiyama 1980；Schantz & Johnson 1992)。BoNT很容易被80℃以上的高温所破坏，特别是在碱性条件下；空气/液体界面形成的气泡能引起神经毒素的伸展和形态改变，进而使BoNT溶液失去毒性，在有氮气和二氧化碳的环境中也能使BoNT变性，稀释至过低浓度(ng/ml)能使BoNT的稳定性降低，失去部分活性。由于BoNT是一个约150 kDa的大分子物质，失去活性的BoNT即成为无毒的类毒素蛋白，该类毒素蛋白是一种很好的免疫原性物质，使注射者产生抗体，进而影响BoNT制剂的进一步治疗效果。如何在稀释过低浓度BoNT制剂过程中保证其稳定性，便成为一个十分重要的措施。试验研究表明，通过用含其它蛋白如明胶、牛或人血清白蛋白的缓冲液(pH＜6.8)稀释BoNT原液才能增强其稳定性(Goodnough & Johnson 1992)。

在我国现有的注射用A型BoNT冻干制剂中都采用了明胶作为制剂中的活性物质保护剂(杨仲1997)，但明胶主要来源于牛对人来说属于异源物质，同时还存在着有病毒污染的危险(例如疯牛病)日本及一些欧美国家已经禁止此类产品进口。本发明是针对以明胶作为注射用A型BoNT冻干制剂中的保护剂存在的不足设计了一种新型的配方用来作为A型BoNT的的冻干保护液，使产品安全性更高，更具有市场竞争力。人血白蛋白是人的血浆中富含的蛋白，人血清白蛋白的分子量约69 kDa，经常被用做蛋白药物保护剂(Kurono 1982；Tarelli1998)，白蛋白主要是通过：(1)减少蛋白活性成分与表面的粘附(2)减少活性成分低稀释度溶液制备过程中可发生的活性成分变性来稳定蛋白活性成分，除了能够稳定药物组合中的蛋白活性成分，与明胶及牛血白蛋白相比，人血白蛋白还具有注射给患者时，通常可忽略其免疫原性的和使用更加安全等优点。

发明内容

本发明通过在A型BoNT的药物制剂中，加入一种经过优选的冻干保护剂，达到稳定A型BoNT的目的，与已上市的A型BoNT药物制剂不同，本发明制品是由药学上可接受的冻干保护剂和A型BoNT结晶复合物组成，其特征在于，其中的冻干保护剂由人用人血白蛋白和乳糖、或由人用人血白蛋白和蔗糖按一定比例组成。

本发明优先的冻干保护剂的配方如下：

人用人血白蛋白    0.5％～10％

乳糖或蔗糖        0.5％～10％

其余为注射用水

本发明的冻干保护剂的配方，更优选的为以下配方：

人用人血白蛋白   1％～5％

乳糖或蔗糖       1％～5％

其余为注射用水

本发明的冻干保护剂的配方，最优选的为以下配方

人用人血白蛋白   2.5％

乳糖或蔗糖       2.5％

其余为注射用水

配方中的人用人血白蛋白选择经过国家食品药品监督管理局批准的可以在市场上流通的人用人血白蛋白，乳糖和蔗糖选择选择经过国家食品药品监督管理局批准的药用乳糖或蔗糖。