[发明专利]突变AOX1启动子

权利要求书

1.野生型巴斯德毕赤酵母醇氧化酶1(AOX1)启动子(SEQ ID No.1)的突变巴斯德毕赤酵母AOX1启动子，其包含选自下组的至少一种突变：

a)转录因子结合位点(TFBS)，

b)Seq ID No.1的核苷酸170至235(-784至-719)、核苷酸170至191(-784至-763)、核苷酸192至213(-762至-741)、核苷酸192至210(-762至-744)、核苷酸207至209(-747至-745)、核苷酸214至235(-740至-719)、核苷酸304至350(-650至-604)、核苷酸364至393(-590至-561)、核苷酸434至508(-520至-446)、核苷酸509至551(-445至-403)、核苷酸552至560(-402至-394)、核苷酸585至617(-369至-337)、核苷酸621至660(-333至-294)、核苷酸625至683(-329至-271)、核苷酸736至741(-218至-213)、核苷酸737至738(-217至-216)、核苷酸726至755(-228至-199)、核苷酸784至800(-170至-154)或核苷酸823至861(-131至-93)，和它们的组合。

2.根据权利要求1的启动子，其特征在于所述启动子还包含Seq ID No.1的核苷酸694至723(-260至-231)和/或核苷酸729至763(-225至-191)的突变。

3.根据权利要求1或2的启动子，其特征在于所述突变是缺失、取代、插入、倒位和/或倍增。

4.根据权利要求1至3任一项的启动子，其特征在于所述转录因子结合位点(TFBS)选自下组：Hap1、Hsf、Hap234、abaA、Stre、Rap1、Adr1、Mat1MC、Gcr1和QA-1F。

5.根据权利要求4的启动子，其特征在于所述转录因子结合位点(TFBS)Hap1包含Seq ID No.1的核苷酸54至58，Hsf包含Seq ID No.1的核苷酸142至149和517至524，Hap234包含Seq ID No.1的核苷酸196至200、206至210和668至672，abaA包含Seq ID No.1的核苷酸219至224，Stre包含SeqID No.1的核苷酸281至285，Rap1包含Seq ID No.1的核苷酸335至339，Adr1包含Seq ID No.1的核苷酸371至377，Mat1MC包含Seq ID No.1的核苷酸683至687，Gcr1包含Seq ID No.1的核苷酸702至706和QA-1F包含Seq ID No.1的核苷酸747至761。

6.核酸分子，包含根据权利要求1至5任一项的至少一种突变巴斯德毕赤酵母醇氧化酶1(AOX1)启动子和编码蛋白质(肽)或功能性核酸的至少一种核酸，其特征在于所述启动子和所述核酸可操作地连接在一起形成单或多拷贝表达盒。

7.载体，其包含根据权利要求1至5任一项的突变巴斯德毕赤酵母醇氧化酶1(AOX1)启动子或根据权利要求6的核酸分子。

8.细胞，其包含根据权利要求1至5任一项的至少一种突变巴斯德毕赤酵母醇氧化酶1(AOX1)启动子、根据权利要求6的至少一种核酸片段或根据权利要求7的至少一种载体。

9.根据权利要求8的细胞，其特征在于所述细胞是真核细胞，特别是酵母细胞，优选甲基营养酵母细胞。

10.根据权利要求9的细胞，其特征在于所述甲基营养酵母细胞选自下组：念珠菌属、汉逊酵母属、毕赤酵母属和球拟酵母属。

11.根据权利要求8至10任一项的细胞，其特征在于所述细胞是巴斯德毕赤酵母细胞。

12.用于表达所选蛋白的试剂盒，所述试剂盒包含：

i)根据权利要求7的载体，和

ii)能够在根据权利要求1至5任一项的启动子控制下表达所述蛋白的细胞。

13.根据权利要求12的试剂盒，其特征在于所述细胞是酵母细胞，优选甲基营养酵母细胞。

14.根据权利要求13的试剂盒，其特征在于所述甲基营养酵母细胞选自下组：念珠菌属、汉逊酵母属、毕赤酵母属和球拟酵母属。