[发明专利]治疗肿瘤的方法和组合物

说明书

技术领域

本发明涉及通过使用来源于一种或者多种微小核糖核酸病毒的分离的核酸序列，包括合成的病毒RNA和互补DNA，来治疗动物肿瘤，尤其是治疗人类肿瘤的方法。本发明也涉及来源于一种或者多种微小核糖核酸病毒的分离的核酸的组合物，以及来源于一种或者多种微小核糖核酸病毒的分离的核酸在制造治疗哺乳动物肿瘤的药物中的应用。

背景技术

溶瘤病毒治疗是一个对于多种人和动物癌症治疗有前途的疗法。例如Shafren等人(2004；“Systemic Therapy of Malignant HumanMelanoma Tumors by a Common Cold-Producing Enterovirus，Coxsackievirus A21”.Clin Cancer Res.10(1)：53-60)通过使用人黑色素瘤NOD-SCID小鼠模型证实了柯萨奇病毒血清型CVA21体内溶瘤能力的有效性。对已形成皮下黑色素瘤异种移植物的免疫缺失小鼠，与磷酸盐缓冲盐水(PBS)治疗对照组相比，CVA21的瘤内(i.t.)用药治疗显示肿瘤负荷显著减少了。CVA 21的腹腔内(i.p.)和静脉内(i.v.)病毒给药途径也已经被证实能有效地减少黑色素瘤异种移植物的负荷。

特定病毒的靶向和溶解易感癌细胞，同时不溶解非恶性、正常细胞的特异性，使这种治疗与传统治疗，例如放疗和化疗相比，显现出许多优势。与细胞恶性转化有关的细胞表面受体表达的特性改变以及细胞信号转导通路的改变，被溶瘤病毒用来从正常细胞中识别癌细胞。PCT/AU2003/001688(公开为WO/2004/054613标题是“通过直接的微小核糖核酸病毒介导的瘤细胞溶解治疗受试者的恶性肿瘤的方法”)，例如，描述了使用埃可病毒(echoviruses)，例如埃可病毒血清型EV1、EV7、EV8和EV22，来破坏多种类型癌细胞，例如乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、卵巢癌以及黑素瘤细胞。细胞识别对于，例如能识别细胞受体α₂β₁以感染细胞的埃可病毒血清型EV1和EV8，和识别补体调控蛋白衰变加速因子(DAF)以感染细胞的EV7或EV22是有利的。同样，能识别至少一种细胞粘附分子，例如细胞间粘附分子-1(ICAM-1)，以及补体调控蛋白，例如DAF的微小核糖核酸病毒也显示能定向破坏癌细胞，例如黑色素瘤、乳腺癌以及前列腺癌细胞。正如在PCT/AU00/01461(公开为WO01/37866标题是“治疗受试者恶性肿瘤的方法以及在其中使用的药物组合物”)中所证实的那样，这种微小核糖核酸病毒包括柯萨奇病毒(Coxsackievirus)例如柯萨奇病毒血清型CVA13、CVA15、CVA18和CVA21。

感染后，溶瘤病毒能够通过直接的溶解感染、诱导调亡或者通过激发对病毒抗原的免疫反应而杀死肿瘤细胞。因而溶瘤病毒不限于单剂输入，它可以进行多周期感染，从而产生大量的子代病毒。这些子代病毒既可以局部扩散到附近的肿瘤细胞，又可以全身性扩散到远处转移部位。溶瘤治疗的这一特性对治疗难以达到的肿瘤或者未确诊的微小转移灶尤其有吸引力。

恶性黑色素瘤

恶性黑色素瘤是来源于活化的或者遗传改变的表皮黑色素细胞的一种肿瘤。在皮肤(表皮基底层)、眼睛、头发和粘膜内的少量的黑色素细胞群通常通过生成并向角质形成细胞分布黑色素而发挥对皮肤/头发着色的作用。在遗传因子和环境因素之间的一批复杂的反应被认为诱导了黑色素细胞的恶性转化，包括遗传倾向和暴露于紫外线照射环境。

恶性黑色素瘤通过许多特定的阶段而进展。起初，局部病变(痣)通常显示出径向生长相(RGP)，局限于表皮。从这里开始，黑色素瘤进展到垂直成长相(VGP)进入真皮，并发展成为具有转移能力的膨胀性肿瘤结节。黑色素瘤进展至这种转移性结节对患者生存具有明显的负面影响。