[发明专利]细胞观察辅助器以及使用该辅助器的细胞观察方法无效

专利信息
申请号: 200680008712.1 申请日: 2006-03-17
公开(公告)号: CN101142309A 公开(公告)日: 2008-03-12
发明(设计)人: 新田尚;金崎士朗;山内明 申请(专利权)人: 艾菲克特细胞研究所股份有限公司
主分类号: C12M1/34 分类号: C12M1/34;C12Q1/02
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司 代理人: 郭文洁;李平英
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要:
搜索关键词: 细胞 观察 辅助 以及 使用 方法
【说明书】:

技术领域

本发明涉及用于细胞观察的细胞观察辅助器(支援器具)以及使用该辅助器的细胞观察方法。

背景技术

有一种细胞观察辅助器,它是为了对细胞进行光学观察的辅助器(非专利文献1)。该辅助器,例如使玻璃板和设置有通过腐蚀刻槽的硅片相对,在二者的相对面之间构成细胞装载区域的辅助器。该辅助剂的结构可以使细胞平面地分散在细胞装载空间内,并通过玻璃板,用显微镜等光学观察设备对细胞进行观察。

通过使用该细胞观察辅助设备,例如可以对细胞的运动能力、对刺激物质的反应,由刺激物质浓度梯度产生的影响等进行观察。

但是在进行细胞观察时,要求细胞分散在观察视野内,并且分别在各自的位置上以固定的状态进行观察。作为这样的观察装置,例如有专利文献1中所列举的技术。该技术是在构成细胞装载空间的面构件的一方设置抽吸用的穿透孔,使各穿透孔与抽吸装置相连进行抽吸,将细胞配置、固定在观察面上。

非专利文献1:Kanegasaki S et al.,(2003)J.Immunol.Methods282,1-11;

专利文献1:特许2747304号公报。

发明内容

发明要解决的课题

在观察细胞时,有时要求在不损伤细胞的状态下,不改变其位置持续进行观察。非专利文献1中所述的技术,根据充满装载细胞空间的液体变动情况细胞有时会产生变化,另外,根据刺激物质的存在情况,细胞有时会向特定方向移动等,在这些情况下将细胞固定相当困难。另一方面,专利文献1中所述的技术,通过在穿透孔中进行抽吸,可以使细胞分散在观察面上。另外如果细胞装载空间的深度与细胞直径相比浅到一定程度,则通过摩擦作用也可以将细胞固定在细胞装载空间的内部或端部。但是如果要使细胞呈二维分散,则细胞将会随机配置。由于难以控制细胞的分散,所以当进行重复实验时,每次实验的细胞配置不同。当进一步向细胞装载空间施用细胞的刺激物质时,该刺激物质的扩散和流动性受到细胞分布的影响。因此,如果细胞配置是随机的,则很难预测作用于各细胞的刺激物质浓度。另外,可以认为在存在磨擦阻力的空间内,通过抽吸而使细胞移动存在对细胞施加大负荷的问题。

本发明的目的在于提供辅助技术,该辅助技术是可以在对充满装载细胞空间的液体流动和物质扩散不产生影响、对细胞不施加大的负荷、并且能够使细胞在所需位置以良好再现的状态进行观察的技术。解决课题的手段

本发明提供细胞观察辅助器,其特征是具有相对的第1面构件和第2面构件,位于所述第1面构件和第2面构件之间并阻止细胞移动的档块;

在所述第1面构件和第2面构件的相对面之间构成细胞装载空间,该装载空间可以装载多个细胞,并且细胞能够在其间移动;

所述第1面构件和第2面构件中至少一方是可以从外部对所述细胞装载空间内进行光学观察的构件;

在所述细胞装载空间内配置1个以上的所述档块。

另外,本发明还提供细胞观察方法,它是在使由相对的第1面构件和第2面构件构成的细胞装载空间中充满液体,向该液体中导入细胞,通过第1面构件和第2面构件中的透明构件对细胞进行光学观察的细胞观察方法,其中,在第1面构件和第2面构件之间配置1个以上阻止细胞移动的档块;

向细胞装载空间内导入多个细胞,以被所述任意一个档块阻止移动的细胞作为观察对象。

档块具有大小为至少阻止1个细胞通过柱形结构体,所述柱形结构体的结构具有不能使细胞通过,但可以使液体通过的液体通过部分。

柱形结构体具有弯曲部分,该部分在向细胞流动的上游侧方向上形成凹形。

档块,其高度可以与所述第1面构件和第2面构件的间隔相等。或者其高度可以小于所述第1面构件和第2面构件的间隔。另外档块的高度还可以相当于对象细胞的直径。

本发明的档块可以是多个档块在一行方向上至少配置成1行的结构。

本发明的档块也可以是将多个档块配置成多行的鸟群型配置结构。

附图的简单说明

[图1]图1(a)是表示有关本发明一个实施方案的细胞观察附助器大致结构的说明图,图1(b)是为了更明确表示本实施方案功能的比较例的说明图。

[图2]图2(a)和图2(b)是从底面一侧观察本发明实施方案中一个作为捕捉细胞的档块示例状态的斜视图。

[图3]图3(a)至图3(c)是表示本发明实施方案中用档块阻止细胞移动原理的说明图。

[图4]图4(a)至图4(c)是表示本发明实施方案中所用各种形式档块的平面图。

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