[发明专利]作为疫苗的复制缺陷型RNA病毒

权利要求书

1.重组负链RNA病毒，其包含在基因N、L和P中的至少一个之中具有突变的病毒基因组，所述突变导致复制能力的丧失而不丧失次级转录能力。

2.权利要求1的病毒，其特征在于，它是副粘病毒。

3.权利要求1或2的病毒，其特征在于，它是仙台病毒。

4.权利要求1-3中任一项的病毒，其特征在于，它在基因P中具有突变。

5.权利要求4的病毒，其特征在于，所述突变涉及由基因P编码的蛋白质的N-端部分序列。

6.权利要求5的病毒，其特征在于，所述突变包括：下列部分的缺失：

(a)由基因P编码的蛋白质的氨基酸2-77，或者

(b)对于复制能力丧失来说足够的(a)的部分序列。

7.权利要求1-6中任一项的病毒，其特征在于，所述病毒基因组包含至少一种编码异源基因产物的序列。

8.权利要求7的病毒，其特征在于，所述异源基因产物是蛋白质、核酶、反义分子或siRNA分子。

9.权利要求7或8的病毒，其特征在于，所述异源基因产物是报告蛋白、抗原或治疗性蛋白质。

10.权利要求7-9中任一项的病毒，其特征在于，所述异源基因产物是选自病毒、细菌和原生动物的异源病原体的抗原。

11.权利要求7-10中任一项的病毒，其特征在于，所述异源基因产物是病毒抗原。

12.权利要求11的病毒，其特征在于，所述病毒基因组编码来自相同或不同病毒的多种异源抗原。

13.权利要求7-12中任一项的病毒，其特征在于，将编码至少一种异源基因产物的序列插入病毒基因组中和/或取代编码同源基因产物的序列。

14.权利要求1-13中任一项的病毒，其特征在于，所述病毒具有相比野生型病毒而言降低至多20倍的转录能力。

15.权利要求1-14中任一项的负链RNA病毒的核衣壳。

16.权利要求1-14中任一项的负链RNA病毒的基因组。

17.DNA分子，其编码权利要求1-14中任一项的重组负链RNA病毒的基因组和/或反基因组。

18.权利要求17的DNA分子，其特征在于，它与转录信号有效连接。

19.权利要求18的DNA分子，其特征在于，所述转录信号是噬菌体启动子，例如T7或SP6启动子。

20.细胞，其包含权利要求1-14中任一项的病毒、权利要求15的核衣壳、权利要求16的基因组或权利要求17-19中任一项的DNA分子。

21.权利要求20的细胞，其特征在于，它是载体增殖性细胞。

22.权利要求20的细胞，其特征在于，它是病毒生产性细胞。

23.权利要求22的细胞，其特征在于，它进一步包含编码异源DNA依赖性RNA聚合酶的DNA分子，所述DNA分子影响编码所述重组负链RNA病毒的DNA分子的转录。

24.权利要求20的细胞，其特征在于，它是病毒扩增性细胞。

25.权利要求20-24中任一项的细胞，其特征在于，它进一步包含编码病毒L、N和/或P蛋白的DNA分子。

26.产生权利要求1-14中任一项的负链RNA病毒的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)制备用编码负链RNA病毒基因组的DNA分子转染的细胞，所述负链RNA病毒基因组在基因N、L和P中的至少一个之中具有突变和可选地包含至少一种编码异源基因产物的序列，所述突变导致病毒基因组复制能力的丧失而不丧失次级转录能力，和

(b)在根据(a)的DNA的转录得以发生并形成所述重组负链RNA病毒的条件下培养所述细胞。

27.权利要求26的方法，其进一步包括从所述负链RNA病毒获得核衣壳或病毒基因组。