[发明专利]反应容器中的不挥发性液体分注方法及反应容器处理装置

说明书

技术领域

本发明涉及一种使用适于以化学反应为主、在医疗现场等进行各种自动分析例如基因分析的研究或临床的反应容器，用于检测以人为主以及动物或植物的基因组DNA的多态性、特别是SNP(单碱基多态性)的反应容器处理装置。可以使用检测出的基因多态性检测结果进行患病率的诊断、给药的种类与效果及副作用的关系的诊断等。

背景技术

作为利用基因多态性来预测疾病的患病容易度等的方法或装置，提出了如下所述的方法或装置。

为了决定患者是否容易患上败血病及/或败血病是否快速进展，从患者身上采集核酸样品，检测该样品中的2型(pattern)等位基因或与2型等位基因连锁不平衡的标记基因，如果检测出2型等位基因或与2型等位基因连锁不平衡的标记基因，则判断为该患者容易患败血病(参照专利文献1。)。

为了诊断人的flt-1基因中的1或1以上的单核苷多态性，通过决定人核酸的1或1以上的位置：1953、3453、3888(分别按照EMBL受理编号X51602中的位置)、519、786、1422、1429(分别按照EMBL受理编号D64016中的位置)、454(按照序列编号3)及696(按照序列编号5)的序列，参照flt-1基因中的多态性，决定此人的体质(参照专利文献2。)。

有关于鉴别SNP位点的碱基即分型的很多手法的报道。下述方法为其中具有代表性的手法。

为了使用较少量的基因组DNA，对涉及到数十万处的SNP位点进行分型，使用基因组DNA及多对引物同时扩增至少包括一个单碱基多态性位点的多个碱基序列，使用扩增后的多个碱基序列，利用分型工序辨别该碱基序列中含有的单碱基多态性位点的碱基。作为该分型工序，使用侵入(invader)法或荧光定量PCR法(Taqman PCR法)(参照专利文献3。)。

专利文献1：JP特表2002-533096号公报

专利文献2：JP特开2001-299366号公报

专利文献3：JP特开2002-300894号公报

专利文献4：JP专利第3452717号公报

本发明人等提出了一种以化学反应的测定或自动地检测基因多态性为目的，适于自动进行化学反应的测定或基因多态性检测的反应容器。

该反应容器至少具备使样品发生反应的反应部及收容比重低于反应液的矿物油等不挥发性液体的不挥发性液体收容部。使用时将不挥发性液体分注于反应部从而覆盖反应液的表面。

利用分注部向反应部分注不挥发性液体时，其分注量有时为数μL左右的微量。利用喷嘴进行分注通常采取在喷嘴中吸入1次的分注量，再全部喷出的方法。但是，分注的不挥发性液体具有粘性，所以即使想要喷出这样的微量而按压与喷嘴相通的注射器，由于不挥发性液体的粘性和空气的压缩，也不能进行正确量的分注，分注精密度变低。

另外，由于不挥发性液体附着于喷嘴的顶端外面等情况，而有时也不能分注不挥发性液体。

如果向反应部分注反应液，以不挥发性液体不能覆盖其上面从而露出的状态下进行反应，则反应中存在反应液蒸发从而不能进行精密度良好的测定的问题。

发明内容

本发明的目的在于能够容易地为了防止反应液的蒸发而向反应容器的反应部分注微量的不挥发性液体。

本发明的不挥发性液体分注方法是在至少具备使样品发生反应的反应部及收容比重低于反应液的不挥发性液体的不挥发性液体收容部的反应容器中，利用喷嘴向所述反应部分注所述不挥发性液体的不挥发性液体分注方法，其特征在于，在用喷嘴吸入并保持1次分注量以上的量的不挥发性液体的状态下进行分注。

作为反应容器的一例还具备收容分型试剂的分型试剂收容部，作为反应部具备分别保持与多个多态性位点分别对应并发出荧光的探针的多个探针配置部的基因多态性诊断用反应容器。这种情况下，向探针配置部分注不挥发性液体。

作为反应容器的其他例，在上述基因多态性诊断用反应容器中还具备收容含有夹着多个多态性位点中各个多态性位点进行结合的多个引物的基因扩增试剂的基因扩增试剂收容部，作为反应部还具备对基因扩增试剂和样品的混合液进行基因扩增反应的扩增反应部。这种情况下，也向扩增反应部分注不挥发性液体。