[发明专利]同位素高度标记的次级微生物代谢产物的制备和其相应的代谢产物

权利要求书

1.用于在液体合成培养基中制备真菌或细菌的同位素标记的次级代谢产物的方法，其特征在于，通过在惰性载体上固定真菌或细菌、在液体合成培养基的加入下进行合成，所述液体合成培养基中基本上所有碳原子、氮原子和/或硫原子被稳定的同位素替代。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于，在液体合成培养基中，糖或糖醇特别是D-[U-¹³C₆]-葡萄糖、¹³C-蔗糖、¹³C-甘油和/或¹³C-乙酸盐用作为碳源，¹⁵N-氨基酸、¹⁵N-硝酸盐、¹⁵N-铵化合物或¹⁵N-脲用作为氮源，³³S-或³⁴S-的硫酸盐、硫化物或氨基酸用作为硫源。

3.根据权利要求1或2的方法，其特征在于，所述液体合成培养基还包含选自具有Na⁺，K⁺，Ca⁺⁺，Mg⁺⁺，Fe⁺⁺⁺，Zn⁺⁺，Cu⁺⁺，B⁺⁺⁺以及CO₃^--，SO₄^--，PO₄^---，NO₃^-离子的无机盐或酸和碱的混合物。

4.根据权利要求1、2或3的方法，其特征在于，将具有大的内表面积的天然或合成载体特别是硅酸盐、层状硅酸盐、沸石、斑脱土、经烧结的粘土、硅土或塑料等用作为惰性载体。

5.根据权利要求4的方法，其特征在于，将天然的或经处理的形式的硅酸铝用作为惰性载体，例如沸石或选自云母矿物质的层状硅酸盐，特别是蛭石。

6.根据权利要求4的方法，其特征在于，将泡沫材料、聚酰胺、二氧化硅、聚乙烯、聚丙烯、聚四氟乙烯或聚酯等用作为惰性合成载体

7.根据权利要求1～6任一项的方法，其特征在于，所述制备在介于3和45℃之间，特别是在介于10和35℃之间的温度范围内进行。

8.根据权利要求1～7任一项的方法，其特征在于，所述同位素标记的次级代谢产物通过萃取和浓缩例如通过联合步骤如固相/液相-液相/液相萃取、离心、过滤、蒸缩、浓缩和蒸发从液体合成培养基中获取。

9.根据权利要求8的方法，其特征在于，作为纯化方法使用色谱法，特别是柱色谱法、制备型薄层色谱法、离子色谱法、亲和色谱法、排阻色谱法和/或制备型高效液相色谱法。

10.根据权利要求1～9任一项的方法制备的真菌或细菌的同位素标记的次级代谢产物，其用于制备在分析学中的内标以用于动物喂食试验中的代谢研究，用于解释代谢循环、降解途径和/或降解时间间隔以及沉积的代谢研究。

11.根据权利要求10的代谢产物，其特征在于，真菌毒素，特别是单端孢霉烯，如雪腐镰刀菌烯醇，脱氧雪腐镰刀菌烯醇，3-乙酰基-脱氧雪腐镰刀菌烯醇，15-乙酰基-脱氧雪腐镰刀菌烯醇，镰刀菌酮-X，T-2毒素，HT-2毒素，DAS，烟曲霉毒素如烟曲霉毒素B1、B2或B3，赫曲毒素如赫曲毒素A、B、C或D，玉米赤霉烯酮、串珠镰刀菌素或黄曲霉毒素如黄曲霉毒素B1、B2、G1或G2用作为所述代谢产物。

12.根据权利要求10的代谢产物，其特征在于毒素诸如内毒素和外毒素特别是大肠杆菌类(Escherichia coli sp.)、沙门氏菌属(Salmonella sp.)、梭状芽孢杆菌属(Clostridium sp.)、芽孢杆菌属(Bacillus sp.)或葡萄球菌属(Staphylococcus sp.)的细菌毒素用作为所述代谢产物。